La resistencia antimicrobiana causada por miembros de la familia Enterobacteriaceae productoras de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) constituyen un problema de salud pública a nivel mundial. Las BLEE son enzimas que confieren resistencia a penicilinas y cefalosporinas de primera, segunda, tercera y cuarta generación, mismas que se expresan en mayor proporción en bacterias gramnegativas. Objetivo: Caracterizar enterobacterias productoras de BLEE en hemocultivos de pacientes atendidos en diferentes áreas del Hospital General Isidro Ayora de Loja, periodo 2019-2020. Materiales y métodos: Estudio documental cuantitativo, descriptivo, transversal. La muestra estuvo constituida por 114 aislamientos. Resultados: Las variables más frecuentes del estudio fueron, sexo femenino (54,4%), grupo etario adulto (39,5%) con edad media de 45 años. Las especies bacterianas prevalentes fueron Klebsiella spp., (43,9%) y Escherichia. coli (39,5%), seguidas de Enterobacter spp., (6,1%), Salmonella spp., (3,5%), Citrobacter freundii (2,6%), Proteus mirabilis (1,8%), Morganella morganii (1,8%) y Serratia marcescens (0,9%). Según la susceptibilidad antimicrobiana, existió alta resistencia a todos los betalactámicos probados, mientras que a los aminoglucósidos, fluoroquinolonas y carbapenémicos presentaron sensibilidad. Las especies predominantes fueron Klebsiella spp., en Hospitalización y Escherichia coli en Emergencia. De todas las especies Klebsiella spp., y Escherichia coli son BLEE (32,5%). Conclusiones: La resistencia a los antimicrobianos causada por Enterobacterias productoras de BLEE se considera un problema de salud grave. Por ello, es importante evaluar y establecer medidas de prevención, control y difusión de las BLEE para reducir la farmacorresistencia y proporcionar un tratamiento eficaz.