Eficacia del aceite esencial de Neem sobre la piel y pelaje de gatos con dermatofito= sis

Effectiveness of neem essential oil on the skin and fur of cats with dermatological condition

¹	Pamela Celeste Núńez Sanaguano	https://orcid.org/0000-0002-2364-9721
	Maestría en Medicina Veterinaria, Universidad Católica de Cuenca, Ecuador.= pamela.nunez.70@est.ucacu= e.edu.ec
²	Pab= lo Giovanny Rubio Arias	htt= ps://orcid.org/0000-0002-9185-482
	Maestría en Medicina Veterinaria, Universidad Católica de Cuenca, Ecuador.= pru= bioa@ucacue.edu.ec
³	Andrés Renato Ordońez Palacios	https://orcid.org/0000-0002-1916-6778
	Facultad de Ciencias Médicas, Universidad de Guayaquil, Ecuador mvz= .renato@gmail.con

	Artículo de Investigación Científica y Tecnológica<= /span> Enviado: 05/07/2022 Revisado: 07/08/2022 Aceptado: 12/09/2022 Publicado:22/09/2022 DOI: https://doi.org/10.3= 3262/anatomiadigital.v5i3.3.2329 =

Cítese:		Núńez Sanaguano, P. C., Rubio Arias , P. G., & Ordońez Palacios, A. R. (2022). Eficacia del aceite esencial de Neem sobre la piel y pelaje de gatos con dermatofitosi= s. Anatomía Digital, 5(3.3), 46-57. https://doi.org/10.33262/anatomiadigital.v5i3.3.2329
		ANATOMÍA DIGITAL, es una Revista Electónica, Trimestral, que se publi= cará en soporte electrónico tiene como misión contribuir a la formación de profesionales competentes con visión humanística y crí= tica que sean capaces de exponer sus resultados investigativ= os y científicos en la misma medida que se promueva mediante su intervención cambios positivos en la sociedad. https://a= natomiadigital.org <= /span> La revista es editada por la Editorial Ciencia Digital (Editorial de prestigio registrada en la Cámara Ecuatoriana de Libro con No de Afiliaci= ón 663) www.celibro.org.ec =
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Palabras claves: Azadirachta indica, dermatofito, dermatoscopio, DTM, lámpara de Wood, tricograma.=		Resumen Objetivo: evaluar el efecto del aceite esencial de Neem (Azadirachta indica) de manera tópica sobre la piel y pel= aje de gatos con dermatofitosis. Metodología: la valoración visual fue la metodolo= gía de valoración más importante, tomando en cuenta las siguientes variables: pi= el: (inflamación, descamación, excoriación, hiperpigmentación, alopecia, y pelaje: (seboso, reseco, quebradizo, mal olor), interpretadas con escalas= de valoración ( 1: no hay mejoría, 2: mejoría lente, 3: mejoría moderada y 4: mejoría total); la investigación manejó un diseńo completamente al azar, conformado por 4 tratamientos: T1 (Testigo), T2 (5 días de aplicación), T3 (10 días de aplicación) y T4 (15 días de aplicación) y T5 (20 días de aplicación), se evaluó en total 30 gatos, 6 animales por cada tratamiento, con el uso de algodón empapado del aceite se cubrió todo la superficie de= la piel y pelo, a cada paciente se le realizó una ficha clínica y dermatológ= ica detallados. Resultados: mostraron diferencias significativas= en los criterios de valoración de piel y pelo así: no hay mejoría, mejoría l= eve, mejoría moderada y mejoría total, con respecto a todas las variables exis= tió mejoría leve, moderada y total, muy pocos animales no mostraron mejoría. = Conclusiones: el aceite de Neem (Azadirachta indica) funciona en el tratamiento de dermatofitosis y mejora de manera visual la piel como el pelaje de gatos afectados dermatológicamente, todos los tratamientos funcionaron siendo el T4 y T5 los mejores, con aplicaciones = de 15 y 20 días consecutivos respectivamente. = ;
Ke= ywords: Azadirachta indica; dermatophyte; dermato= scope; DTM; trichogram; Wood's lamp.	<= /span>	Abstract Objective:= to evaluate the effe= ct of Neem essential oil (Azadirachta indica) topically on the skin a= nd coat of cats with dermatophytosis. Methodology: visual assessment = was the most important assessment methodology, taking into account the follow= ing variables: skin: (inflammation, flaking, excoriation, hyperpigmentation, alopecia, and fur: (oily, dry, brittle, bad smell), interpreted with scal= es assessment (1: no improvement, 2: slight improvement, 3: moderate improve= ment and 4: total improvement); the research used a completely randomized desi= gn, made up of 4 treatments: T1 (Control), T2 (5 days of application ), T3 (10 days of application) and T4 (15 days of application) and T5 (20 days of application), a total of 30 cats were evaluated, 6 animals for each treatment, with the use of cotton soaked in the oil, all the surface of t= he skin and hair, each patient underwent a detailed clinical and dermatologi= cal record. Results: they showed significant differences in the evalua= tion criteria of skin and hair as follows: no improvement, slight improvement, moderate improvement, and total improvement, regarding all the variables there was slight, moderate, and total improvement, very few animals did n= ot show improvement. Conclusions: Neem oil (Azadirachta indica) works= in the treatment of dermatophytosis and visually improves the skin as well as the fur of dermatologically affected cats, all treatments worked, being T4 and T5 the best, with applications of 15 and 20 days. consecutive, respectively.

Introducción

Los estudios manifiestan que en la consulta veterinaria de mascotas especialmente perros y gatos, aproximadamente del 2= 0 al 70% se encuentran relacionadas de manera directa a problemas de piel y anex= os y su forma fácil de manifestación visual condiciona a los dueńos a que lleven= a sus mascotas al especialista (1), l= as enfermedades dermatológicas han demostrado tener grandes afectaciones a la calidad de vida de los animales, como de sus propietarios ADDIN CSL_CITATION {"citationItems":[{"id":"ITEM-1","itemDa= ta":{"DOI":"10.5380/avs.v22i4.56944","ISSN&qu= ot;:"1517784X","abstract":"Many difficulties are encountered by the clinician within veterinary dermatology. The analysis of each step to be followed during the clinical consultation w= ill show the critical points and assist the veterinarian in the conclusion of t= he cases. The objective of this review is to address the main influences in the diagnosis of dermatological diseases in small animals. A good relationship = with the tutor is essential, so that it provides a good record and assumes the c= osts of the complementary exams. Errors in diagnosis occur when the anamnesis is incomplete or erroneously completed, superficial physical examination or hastily done and by precipitated or false evaluation of the clinical findin= gs. The choice of complementary exams should be made in a coherent way, since e= ach exam has its adequate technique. For the Demodex sp. by means of the skin scraping technique, this should be performed up to the deeper layers of the skin. In cytology, poor quality samples occur when there is too much blood, inadequate puncture pressure, thick smear and insufficient dye contact time. Sampling for bacterial culture should not be performed from areas with wet erosions and many crusts. Early diagnosis of dermatophytosis is necessary b= oth for the initiation of a treatment and for limiting the contagion with other animals and people. In cutaneous biopsy, the samples must be of early lesio= ns (primary lesions) except in atrophic diseases of the cutaneous appendages. = Good communication with the tutor, special attention to all stages of the clinic= al consultation, not seeking immediate results, easy contact with the laborato= ry and the care with sample collection for complementary tests have a positive influence on the dermatological diagnosis.","author":[{"dropping-particle":"&= quot;,"family":"Madureira","given":"Rena= ta","non-dropping-particle":"","parse-names&q= uot;:false,"suffix":""},{"dropping-particle":= "","family":"Sperotto","given":&quo= t;Juliana","non-dropping-particle":"","parse-= names":false,"suffix":""}],"container-title&q= uot;:"Archives of Veterinary Science","id":"ITEM-1","issue":"4&q= uot;,"issued":{"date-parts":[["2017"]]},"= ;page":"9-19","title":"Diagnóstico dermatológico em pequenos animais: O que pode influenciar?","type":"article-journal","volum= e":"22"},"uris":["http://www.mendeley.com/doc= uments/?uuid=3D1797af5c-4a1b-4aad-87a9-48b496a15f36"]}],"mendeley= ":{"formattedCitation":"(2)","plainTextFormat= tedCitation":"(2)","previouslyFormattedCitation":&= quot;(2)"},"properties":{"noteIndex":0},"sche= ma":"https://github.com/citation-style-language/schema/raw/master= /csl-citation.json"}(2), s= in dejar atrás la posibilidad de transmitir enfermedades zoonóticas e importan= tes en salud pública, y la capacidad de presentar resistencias a los antimicrobianos, de manera especial en los grupos bacterianos (3).

Sobre las enfermedades dermatológicas en los felinos domésticos, exi= sten estudios que demuestran menor prevalencia de dermatofitosis con respecto a otras enfermedades dermatológicas, y los caninos mantienen la mayor prevale= ncia según varios países europeos como latinoamericanos (4), a= demás las manifestaciones de enfermedades dermatológicas de la piel de los felinos domésticos no se muestran de manera característica como en los caninos (5).

Los gatos por sus hábitos = de vida, presentan en su piel y pelo agentes fúngicos, los cuales son conocidos como hongos queratinofílicos y queratinolíticos, su presencia en los animal= es, y cambios en el estado inmunológico, debido a la presencia de otras enfermedades o situaciones de estrés, permitiendo que los hongos se activen= y modifiquen el estado de salud de los mismos; con el incremento de riesgos zoonóticos hacia los humanos que conviven con sus mascotas (6). Estudios recientes utilizando aceites esenciales (AE), tales como los presentes en la planta del neem (Azadirachta indica) han logrado una eficacia medicinal de ti= po antimicrobiano, anticancerígeno, antiprotozoal, antiinflamatorio, antiviral= y principalmente insecticida, convirtiéndolos en una alternativa opcional de tratamiento en la actualidad (7)

Dentro de= la piel la estructura más importante la constituye la capa córnea ya que es el componente externo de los animales y los humanos, allí se encuentra las proteínas encargadas de la agregación y compactación de estos filamentos de queratina, conocida principalmente como filagrina, el cual proviene del acrónimo filament-aggregating protein (8), esta capa constituye la más externa = de la epidermis, actúa como una barrera de protección que no permite el ingreso de agentes patógenos (9)

El árbol de Neem (<=
i>Azadirachta indica) en la india se la llama comúnmente Indian Lila, p=
ertenece a la familia Meliaceae, de la subfamilia Meloideae y=
 tribu Melieae, éste árbol es de los más versátiles del trópico, de =
elevado potencial al tener varios productos de tipo no madereros muy útiles=
 como su corteza, hojas, frutos, semillas (10)<=
!--[if supportFields]>; Azadirachta es considerado un árbol de hoja perenne, que va desde los tamańos pequeńo=
s a los más grandes de rápido crecimiento , se caracteriza por tener las ra=
mas anchas y extendidas, además que puede tolerar elevadas temperaturas, as=
í como en los suelos pobres de alto degrado (11)<=
!--[if supportFields]>; el aceite de Neem=
 tiene al menos unos 100 componentes activos biológicamente, de manera prin=
cipal triterpenos, de los cuales los más importantes los limonoides, de man=
era especial la azadiractina (12)<=
!--[if supportFields]>.=

Los aceites esenciales representan un uso destac= ado hoy en día gracias a la industria farmacéutica, importantes al convertirse = en productos alternativos, de excelente eficiencia y de bajo costo, que inclus= ive puede sustituir otros fármacos sintéticos tradicionales usados comúnmente <= /span>(13); por lo tanto la investigación tuvo c= omo objetivo evaluar el efecto del ac= eite esencial de Neem (Azadirachta indica) de manera tópica sobre la piel= y pelaje de gatos con afectaciones dermatológicas y su valoración a través de dermatoscopia y escala de valoración visual. La Investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto del aceite esencial de Neem (= Azadirachta indica) de manera tópi= ca sobre la piel y pelaje de gatos con dermatofitosis.

Metodología

Unidades experimentales y diseńo del tratamiento. Se evaluaron 30 gatos, que asistieron a consulta al centro de Rescate “Patitas al Rescate”, de la ciudad de Guayaquil en la provincia de Guayas y= de la evaluación se le diagnosticó con patologías dermatológicas. A cada paciente= , le fue llenada una ficha clínica y dermatológica. Cada felino del Centro de Rescate fue analizado previo el consentimiento de la directiva vigente del lugar, los animales fueron tratados dentro del marco que refleja las cinco libertades, lo cual garantizó que no existiera en el proceso de recolección= de muestras, como del tratamiento maltrato animal, se excluyó felinos que no mostraron signos patológicos relacionados a piel o pelo, además de cachorros menores de 6 meses y hembras en estado de gestación.

Los pacientes fueron asignados al azar a un experimento en el cual se conformó con 5 tratamientos de 6 gatos cada uno: T1 (Testigo), T2 (5 días de aplicación), T3 (10 días de aplicación), T4 (15 días de aplicación) y T5 (20 días de aplicación).

Diagnóstico de la Dermat= ofitosis. Para el diagnóstico de m= anera específica de la dermatofitosis se utilizó la metodología de Wood (14), ayudados del dermatoscopio ^®Dermlite DL100 se caracterizó las alteraciones cutáneas presentes en la piel, con el raspado de la zona afect= ada, y mediante citología se diagnosticó si existía la presencia de bacterias con microscopia clínica ^®Olympus BX4, además se aplicó como prueba diagnóstica confirmatoria el Test Agar de dermatofitos ®DTM; adicionalmente= se realizó el estudio de tricograma para observar características más específicas del folículo piloso como de la estructura capilar superficial.<= /span>

Aplicación del tratamiento. Se aplicó el aceite embebido en algodón = a los pacientes cubriendo el lomo, los flancos derecho e izquierdo, extremidades anteriores= y posteriores, de manera primaria sobre el pelo, y posteriormente en la piel, realizando u= n deslizamiento más profundo del algodón sobre las zonas más afectadas; el proceso duró por animal 10 minutos, Luego se dejó reposar a cada gato por 20 minutos más, es= te proceso se lo realizó por cada día según el tiempo de aplicación, la valora= ción de las variables en estudio se lo hizo cada cinco días post tratamiento, me= diante escalas de valoración visual, con la ayuda del dermatoscopio ^®De= rmlite DL100, lámpara de Wood y ^®DTM.

Análisis estadístico. <= span style=3D'mso-fareast-language:ES-EC'>Las variables respuestas estudiadas correspondieron al proceso de evaluación de la piel (inflamación, descamaci= ón, escoriación, hiperpigmentación y alopecia) a las cuales se valoró en 4 categorías (1: no hay mejoría; 2: mejoría leve; 3: mejoría moderada = y 4: mejoría total). Así mismo se evaluó la condición del pelaje (seboso, quebradizo, reseco, mal olor) a las cuales se valoró de la misma man= era (1: no hay mejoría; 2: mejoría leve; 3: mejoría moderada y 4: mejoría total).

Todas estas categorías de acuerdo con = el tratamiento asignado fueron analizadas de manera estadística mediante ANOVA= .

Resultados

Como se muestra en la Tabla 1, se puede observar el efecto del tratamiento con extracto de Neem sobre las variables= de evaluación de piel en estudio (inflamación, descamación, escoriación, hiperpigmentación, alopecia), en las que se observa que la aplicación conti= nua por 20 días se mostró como el mejor tratamiento, en la cual las valoracione= s de 4.00, 3.67, 4.00, 3.50, 3.67, interpretado al valor 4 como mejoría total y 3 como mejoría moderada del aceite de Neem, sobre las variables inflamación, = descamación, escoriación, hiperpigmentación y alopecia, al presentar diferencias significativas p<0.05 en comparación con los tratamientos T2, T3 y T1 (testigo).

Tabla 1.

Eficacia del aceite de Neem entre tratamientos sobre las variables de evaluación de la piel de gatos, siguien= do la valoración (1: n= o hay mejoría, 2: mejoría leve, = 3: mejoría moderada y 4: mejoría total).

Categorías

Tratamientos

T1

T2 (5 días)

T3 (10 días)

T4 (15 días)

T5 (20 días)

Valoración de piel

Inflamación

1.00^b

3.00^a

3.33^a

3.67^a

4.00^b

Descamación

1.00^c

2.00^a

2.50^ab

2.83^ab

3.67^bc

Escoriación

1.00^d

2.33^a

2.83^ab

3.50^bc

4.00^d

Hiperpigmentación

1.00^d

1.83^a

2.33^ab

2.83^bc

3.50^c

Alopecia

1.00^c

1.17^a

2.83^b

3.33^b

3.67^b

Letras distintas en la misma fila mostro diferencia significativa p&l= t;0.05

En la Tabla 2 se puede apreciar el efecto del tratamiento con extracto de Neem sobre las variables de evaluación de pelaje en estudio (quebradizo, reseco y mal olor), en las que se observa que la aplicación continua por 20 días se most= ró como el mejor tratamiento, en la cual las valoraciones de 3.83, 3.83 y 4.00 interpretado al valor 4 como mejoría total y 3 como mejoría moderada del ac= eite de Neem, sobre las variables quebradizo, reseco y mal olor, al presentar diferencias significativas p<0.05= en comparación con los tratamientos T2, T3 y T1 (testigo).

Tabla 2.

Comparación entre tratamientos de la eficacia del aceite de Neem sobre las variables de evaluación del pelaje de= los gatos, siguiendo la valoración (1: n= o hay mejoría; 2: mejoría leve; = 3: mejoría moderada y 4: mejoría total)

Categorías

Tratamientos

T1 (testigo)

T2 (5 días)

T3 (10 días)

T4 (15 días)

T5 (20 días)

Valoración del pela= je

Quebradizo=

1.00^c<= /span>

1.83^a<= /span>

3.17^b<= /span>

3.17^b<= /span>

3.83^b<= /span>

Reseco<= /span>

1.00^d<= /span>

2.33^a<= /span>

3.00b^b<= /span>

3.67^c<= /span>

3.83^c<= /span>

Mal Olor

1.00^c<= /span>

3.00^a<= /span>

3.00^a<= /span>

3.83^b<= /span>

4.00^b<= /span>

Letras distintas en la misma fila mostro diferencia significativa P<0,05

Discu= sión

Se puede apreciar el efecto del aceite= de Neem sobre el resultado de la mejora de la inflamación independientemente d= el tratamiento de aplicación del aceite de Neem al que fueron sometidos los felinos, así como lo refiere Singh et al (15), que la aplicación continua del aceit= e de Neem sobre pacientes tratados con heridas provocadas de diabetes graves pro= vocadas, en la cual más del 50% sanaron en un total de 12 semanas de tratamiento, en= el 75% de pacientes.

La eficacia del aceite de Neem en la m= ejora de la descamación de la epidermis de los gatos, se encuentra directamente relacionado con las células existentes en la epidermis, de las cuales los queratinocitos y fibroblastos gracias al efecto del aceite de Neem envuelto= en vesículas de argán mediante nanotecnología según lo refiere Manaca et al= (16) permitió que disminuya el estrés oxid= ativo y la migración de estas células para el cierre más rápido de las heridas, lo cual afecta a la integridad de las células epiteliales y la disminución del descame excesivo en enfermedades dermatológicas, demostrado en la mejoría de esta variable en la presente investigación.

Con respe= cto al efecto positivo del aceite de Neem sobre la variable escoriación de la epidermis de los gatos, todos los tratamientos mostraron desde mejoría leve hasta mejora total, siendo el T4 el mejor tratamiento, logrando que el 50% = de felinos se recuperen, así lo refiere Giuggioli et al (17), que la aplicación de una crema a bas= e de aceite de Neem conjuntamente con Hypericum perforatum, en úlceras calcinosas de personas con la patología esclerodermia, se recuperaron en un= 45% es decir (15/33) de manera total en un tiempo de 40 días, mientras que los otros pacientes 18/33 que representó el 55% se observó mejoría en el eritem= a.

Se puede apreciar el efecto del aceite de Neem sobre el resultado de la mejora de la= hiperpigmentación de la piel de los gatos, de 30 animales testeados el 51% mostraron mejoría,= lo cual significa que los felinos se recuperaron de manera favorable, tal cual= lo refiere Daniel et al (18) en un estudio de 24 perros diagnostic= ados con Malassezia en la cual valoraron hiperpigmentación como una signología importante de la enfermedad dermatológica, demostraron que la aplicación tópica de aceite de Neem conjuntamente con el consumo vía oral de Itraconazol a los 14 días primarios de tratamiento existió una recuperación= de los pacientes del 41,22% y del 91,22% a los 28 días de tratamiento.<= /p>
El efecto del aceite de Neem mostró un= a notable mejoría de la alopecia de los gatos, de los 30 felinos en estudio, el 53.33% mostraron mejoría, así como lo ref= iere Daniel et al (18), en la cual los perros con enfermedad= es fúngicas mejoraron en un 45%, en los primeros 14 días de tratamiento, incluyendo otras sintomatologías adyacentes como alopecia.

La eficac= ia del aceite de Neem sobre el resultado de la mejora de la variable seboso y quebradizo de la evaluación del pelaje de los gatos, de 30 animales testead= os 43.33% y 53.33% mejoraron de manera total respectivamente, aunque las investigaciones no detallan de manera específica estos beneficios capilares, los diferentes estudios determinan que el uso solo del Neem como mixto, es decir con otras plantas naturales para el cuidado del cabello generan beneficios en la integridad de la fibra capilar como lo refiere Campos e= t al (12).

El efecto del aceite de Neem sobre la evaluación del pelaje, específicamente la variable reseco de 30 animales testeados el 66.7% mostraron mejoría y aunque no existe información sobre e= sta valoración en específico, de igual manera las investigaciones del uso de plantas para cosmética y preparaciones de cabello detallan sus múltiples be= neficios sobre el brillo, y cura de muchas patologías capilares como caspa, resequed= ad como lo refiere Tambolli et al (19),y Rathi et al (20).

La investigación demostró que el efecto del aceite de Neem fue altamente eficaz sobre el mal olor de la piel de los gatos con dermatofitosis, obteniéndose = el 80% de mejora en los 30 animales testeados, lo cual significa que los felin= os se recuperaron de manera positiva e inmediata a partir de los primeros cinco días de tratamiento, logrando recuperación absoluta a los 20 días de aplica= ción del aceite de Neem de la misma manera que lo refiere Daniel et al (18) en un estudio de 24 perros con enferm= edad por levaduras, en la cual evaluaron mediante el olfato al mal olor como signo de la enfermedad, la aplicación tópica de aceite de Neem conjuntamente con el consumo vía oral de Itraconaz= ol a los 14 días primarios de tratamiento existió una recuperación de los pacien= tes del 41.22% y del 91.22% a los 28 días de tratamiento.

Concl= usiones

·         El mejor tratamiento de aplicación del aceit= e de Neem (Azadirachta indica) sobre la piel y pelaje con felinos diagnos= ticados dermatofitosis, fue los 20 días de aplicación sobre todas las variables de evaluación de piel y pelo.

·&nb= sp;        La aplicación del aceite de Neem de 5, 10, 1= 5 y 20 días funciona de manera positiva sobre la piel y pelaje de gatos diagnosticados con dermatofitosis sobre las variables en estudio: inflamaci= ón, descamación, escoriación, hiperpigmentación, alopecia, sebosidad, quebradiz= o, reseco y mal olor; obtuvo mejorías desde leves, moderadas y totales, siendo= aún mejor sobre las variables de evaluación de pelo esto es reseco y de mal olo= r, los cuales obtuvieron mejoras moderadas y totales en todos los felinos analizados desde los 5 días de aplicación.

Confl= icto de intereses

Los autores certifican que no existen conflictos de interés en el presente trabajo.

Agrad= ecimientos

Cordial agradecimiento al centro de Rescate “Patitas al rescate”, Healthy Pet, RenatoVetDerm, VetSpaLuis.

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Categorías	Tratamientos
T1	T2 (5 días)	T3 (10 días)	T4 (15 días)	T5 (20 días)
Valoración de piel	Inflamación	1.00^b	3.00^a	3.33^a	3.67^a	4.00^b
Descamación	1.00^c	2.00^a	2.50^ab	2.83^ab	3.67^bc
Escoriación	1.00^d	2.33^a	2.83^ab	3.50^bc	4.00^d
Hiperpigmentación	1.00^d	1.83^a	2.33^ab	2.83^bc	3.50^c
Alopecia	1.00^c	1.17^a	2.83^b	3.33^b	3.67^b

Categorías	Tratamientos
T1 (testigo)	T2 (5 días)	T3 (10 días)	T4 (15 días)	T5 (20 días)
Valoración del pela= je	Quebradizo=	1.00^c<= /span>	1.83^a<= /span>	3.17^b<= /span>	3.17^b<= /span>	3.83^b<= /span>
Reseco<= /span>	1.00^d<= /span>	2.33^a<= /span>	3.00b^b<= /span>	3.67^c<= /span>	3.83^c<= /span>
Mal Olor	1.00^c<= /span>	3.00^a<= /span>	3.00^a<= /span>	3.83^b<= /span>	4.00^b<= /span>