Use and chemical analysis of different substrates for t=
he
development of bacterial biomass
Sandra
Gabriela Barrazueta Rojas.[1], Geovanny
David Yánez Tisalema.[2], Guillermo
Xavier Mendoza Zurita.[3], Mercedes
Leticia Lara Freire.[4]
Recibido: 03-07-2019 / Revisado: 16-0=
7-2019
/Aceptado: 11-08-2019/ Publicado: 10-09-2019
In the Faculty of Animal Scienc=
e at
the Polytechnic School of Chimborazo, the effect of different substrates
(molasses and whey) and culture conditions (agitation and static) were
evaluated for the development of bacterial biomass of Lactobacillus casei, using ammonium phosphate as nitrogen source
and a temperature of experimental of 34 – 36°C. The results were analyzed u=
sing
mean separation according Friedman (P<0.05). Setting the effect of the
substrates and conditions on the specific growth rate, viability, biomass y=
ield
and indicator benefit/cost, being the treatment with stirring molasses (MA)
which had the highest specific growth rate (0,087h-1) however, t=
he
growth in this treatment was affected by limiting substrate (ammonium
phosphate), which led to viable cell counts (6,66 Log CFU/ml) and biomass
yields (0,11 g.g-1) low, compared to treatment with whey agitati=
on
(LA), same that yielded the highest values of viability and biomass yield (=
7,86
Log CFU/ml y 0,26 g.g-1) with a specific growth rate of 0,052 h<=
sup>-1,
it is also the most cost – effective treatment as it recorder a beneficial/=
cost
of 0,063 cents for every dollar invested. The results demonstrate the
effectiveness of using whey as a substrate for the production of bacterial
biomass and stirring condition as the ideal for the development of
microorganisms
Keywords: Substrate, biomass, Lactobacillus
casei.
Resumen
En la Facultad de Ciencias
Pecuarias de la Escuela Superior Politécnica de Chimborazo, se evaluó el ef=
ecto
de distintos sustratos (melaza y lactosuero) y condiciones de cultivo
(agitación y estático), para el desarrollo de biomasa bacteriana de Lactobacillus casei, utilizando fo=
sfato
de amonio como fuente de nitrógeno y una temperatura de experimentación de =
34 –
36°C. Los resultados fueron analizados mediante separación de medias según
Friedman (P<0,05), Estableciendo el efecto de los sustratos y condiciones
sobre la velocidad especifica de crecimiento, viabilidad, rendimiento de
biomasa e indicador beneficio/costo, siendo el tratamiento con melaza en
agitación (MA) el que presentó la mayor velocidad específica de crecimiento
(0,087h-1), sin embargo, el crecimiento en este tratamiento se v=
io
afectado por el sustrato limitante (fosfato de amonio), lo que condujo a
recuentos de células viables (6,66 Log UFC/ml) y rendimientos de biomasa (0=
,11
g.g-1) bajos, en comparación con el tratamiento con lactosuero en
agitación (LA), mismo que permitió
obtener los mayores valores de viabilidad y rendimiento de biomasa (7,86 Log
UFC/ml y 0,26 g.g-1) con una velocidad específica de crecimiento=
de
0,052 h-1, además es el
tratamiento más rentable ya que registró un beneficio/costo de 0,63 centavos
por cada dólar invertido. Los resultados obtenidos demuestran la eficacia d=
el
uso del lactosuero como sustrato para la producción de biomasa bacteriana y=
la
condición de agitación como la ideal para el desarrollo de los microorganis=
mos.
Palabras clave: sustrato, biomasa. Lactobacillus
casei.
Introducción.<=
/span>
Según la FAO (2002), los probióticos son
“microorganismos vivos que ejercen una acción benéfica sobre la salud del
huésped al ser administrados en cantidades adecuadas”. Dentro de los
microorganismos probióticos se encuentran los Lactobacillus spp., los cuales son bacterias áci=
do
lácticas (BAL) que se caracterizan por los diferentes usos e importancia a
nivel industrial y, en ocasiones, utilizadas como fermentadores de alimentos
cárnicos, lácteos y vegetales, además del uso en biopreservación, para incr=
ementar
la vida útil de los productos o como potencial probiótico en la industria
(Silveira, M. et al., 2003).
Jiménez, R.et
al. (2009), manifiestan que la aplicación de los probióticos en el
mejoramiento de la salud, conservación de alimentos y producción animal ha
generado la necesidad de contar con los sustratos disponibles para su
producción. Los medios tradicionalmente usados en el cultivo de biomasa
probiótica son complejos, de costos elevados y difíciles de adquirir. La
búsqueda de sustratos y condiciones de cultivo que permitan la obtención de
altas densidades de microorganismos (>106UFC/ml), ha sido la =
meta
de muchas empresas, que están interesadas en las bacterias acido lácticas, =
no
sólo como microorganismos iniciadores, sino también como un ingrediente o
aditivo probiótico para aumentar el valor nutritivo de sus productos.
La melaza de caña de azúcar en su composición pres=
enta
un 80% de azúcares principalmente sacarosa (Gilces, P. y Veloz, P., 2006), =
y el
lactosuero dulce ofrece de 4,5 a 5% de lactosa (Chamorro, M y Losada, M.,
2002); estos azúcares constituyen una fuente de carbono para muchos seres
vivos.
Por todo lo señalado el objetivo de la presente
investigación es utilizar melaza y lactosuero como sustrato principal para =
el
desarrollo de biomasa bacteriana, suplementados con fosfato de amonio como
fuente de nitrógeno, empleando Lact=
obacillus
casei como inóculo de carácter probiótico y aplicando dos condiciones
(agitación y estático), que favorezcan el crecimiento, viabilidad y rendimi=
ento
de biomasa del microorganismo.
Materiales y
Métodos
Materia
prima para elaboración de sustratos
Materia
prima para recuento bacteriano
En esta investigación se preparó dos sustratos, un=
o a
base de melaza y otro a base de lactosuero, cuyas formulaciones se detallan=
en
el (tabla 1).
Tabla 1. Formulación d=
e los sustratos
a base de melaza y lactosuero.
|
COMPONENTE |
FÓRMULA PARA LA MELAZA |
FÓRMULA PARA EL LACTOSUERO |
|
Melaza (ml) |
20 (8%) |
- |
|
Lactosuero (ml) |
- |
248 (99,2%) |
|
Fosfato de amonio (<=
/span>NH4H2PO4) (gr) |
2,5 (1%) |
2 (0,8%) |
|
Agua destilada (ml)<= o:p> |
227,5 (91%) |
- |
|
TOTAL (ml) |
250 (100%) |
250 (100%) |
· =
Cada formulación se preparó en matraces de 250 ml
(biorreactores a escala de laboratorio), se inoculó con 0,05% (125 mg) de c=
epa
de L, casei, y fueron incubadas=
a una
temperatura de 34 – 36°C.
· =
Cada 24 horas se tomó 5 ml de muestra para realizar sie=
mbras,
recuentos y evaluación de las variables de estudio.
Para la presente investigación se utilizó12 litros=
de
melaza y 12 litros de suero de leche, los mismos que fueron distribuidos en=
dos
condiciones (agitación y estático) con 6
repeticiones. Los resultad=
os
experimentales fueron analizados por separación de medias mediante la prueb=
a no
paramétrica de Friedman (P<0,05).
Resultados y
Discusión
La velocidad específica de crec=
imiento de L.
casei, frente a los tratamientos: LE, LA, ME y MA, desplegaron valores
medios según la prueba no paramétrica de Friedman de: 0,026; 0,052; 0,020 y
0,087 h-1; de los cuales el tratamiento LA (0,052h-1)=
y
MA (0.087h-1), presentan diferencias altamente significativas en=
tre
ellos y con los demás tratamientos (P<0,01), mientras que los tratamient=
os
LE (0,026 h-1) y ME (0,020 h-1) comparten significanc=
ia
entre ellos pero difieren significativamente del resto de tratamientos
(P<0,01), como reporta el (cuadro 2).
Los tratamientos en agitación
presentaron los valores más altos de crecimiento bacteriano, observándose e=
n la
melaza un crecimiento 40% mayor al del lactosuero en la misma condición. Se=
gún
Kazuhiko,T. y Kozo, T.(1995),la
agitación incrementa la velocidad de transferencia de nutrientes del medio a
las células, mejorando la homogenización de nutrientes y aumentando la
velocidad de transferencia de productos metabólicos de las células hacia el
medio, en contraste con los tratamientos que permanecieron en reposo (LE y =
ME),
los cuales presentaron los valores más bajos debido a la ausencia de movimi=
ento
de los componentes nutricionales del medio, sobre todo la melaza estática c=
uya
velocidad de crecimiento es menor en un 77% en relación a la melaza en
agitación, de esta manera se afirm=
aría
que en el presente trabajo la melaza tuvo una dependencia directa de la agitación para procurar el
crecimiento de L. casei el cual=
realiza
sus actividades metabólicas mejor en condiciones de agitación, aunque esto
signifique, un mayor gasto de energía al usar agitadores o biorreactores con
sistemas de agitación o centrifugación.
Tabla 2.
|
=
|
=
TRATAMIENTO |
=
VARIABLES |
||||
|
CÓDIGO |
SUSTRATO |
CONDICIÓN |
velocidad especifica de
crecimiento µ(h-1) |
viabilidad (Log UFC/ml) |
Rendimiento de biomasa Y (=
x/s) |
PROB. |
|
LE |
LACTOSUERO |
ESTATICO |
0.026cd |
7,30b |
0,16b |
0,0001 |
|
LA |
LACTOSUERO |
AGITACIÓN |
0,052b |
7,86a |
0,26a |
0,0001 |
|
ME |
MELAZA |
ESTATICO |
0,020d |
5,98d |
0.013d |
0,0001 |
|
MA |
MELAZA |
AGITACIÓN |
0,087a |
6,66c |
0,11c |
0,0001 |
Prob.: Probabilidad
Medias con una letra común en u=
na
misma columna no son significativamente diferentes según la Prueba de Fried=
man
(p < 0,01)
Figura
1. =
Curvas de crecimiento de L. casei en cada tratamiento
Tomando en cuenta el factor
sustrato en los tratamientos empleados podemos establecer que los mismos
presentan en su composición nutrientes que han sido aprovechados por las
bacterias para mantener un buen crecimiento, como asegura García, C. (2013)
quien menciona que la concentració=
n de
microorganismos se muestra influido con la velocidad con que aumenta la
población bacteriana, la cual para un tipo de microorganismo depende
principalmente de la composición y concentración del medio de sustrato,
presencia de inhibidores, temperatura y pH; en base a esto se puede deducir=
que
se obtuvo una buena velocidad de crecimiento en el tratamiento MA, en primer
lugar, porque éste medio estaba formado principalmente por melaza en un 8%,
cuyo principal componente es la sacarosa
(60-63%) (Vaca, R., 2011), el mismo que sufre una transformación a
monómeros de azúcar (glucosa y fructosa) por la enzima invertasa, que puede
disminuir su actividad a concentraciones altas de sustrato, a determinadas
temperaturas y Ph, permitiendo el aumento de la velocidad de crecimiento
(Kazuhiko,T. y Kozo, T., 1995).La
velocidad específica de crecimiento (µ),
fue evaluada en la fase de crecimiento exponencial, la cual en la
mayoría de los tratamientos se dio entre 24 y 48 horas de cultivo en los
sustratos naturales para luego entrar en un declive progresivo de la curva =
de
crecimiento bacteriano (gráfico 1), esta situación de dio principalmente en=
la
melaza en agitación, debido a la baja concentración del sustrato melaza; lo=
que
aceleró la muerte celular. El buen crecimiento en el tratamiento MA se hubi=
era
mantenido al emplear mayores niveles de melaza, como lo hicieron Ossa, J.,
Vanegas, M. y Badillo, A. (2010), al emplear diferentes niveles de melaza p=
ara
crecimiento de bacterias probióticas, donde un 20% de melaza fue el mejor t=
ratamiento
para obtener recuentos de hasta 109 UFC/ml. En cuanto al tratami=
ento
LA, la velocidad de crecimiento fue un 40% menor que la MA, sin embargo, la
muerte celular fue más lenta como se observa en la curva de crecimiento en =
el gráfico
1, esto puede atribuirse a la mayor disponibilidad de nutrientes en el
lactosuero y sobre todo tomando en cuenta que el L.
casei, por ser una bacteria acido láctica, tiene la cualidad de ferment=
ar
la lactosa como sustrato preferencial (Jiménez, R. et al., 2009). Otra característica que pudo influir en el buen
crecimiento de L. casei en el
lactosuero y su muerte tardía dentro del medio, fue la presencia de una may=
or
concentración de proteínas, puesto que para el lactosuero dulce se ha repor=
tado
una concentración de proteínas de 0,8-1,0 % de los sólidos totales (Chamorr=
o, M
y Losada, M., 2002).
El valor de velocidad específic=
a de
crecimiento de L. casei en el m=
edio
MA (0,087 h-1) arrojados en la presente investigación es superio=
r a
los reportados por Velásquez, J. et=
al.
(2015), quienes obtuvieron un máximo valor experimental de velocidad especí=
fica
de crecimiento de 0,061h-1. También el trabajo efectuado por Leó=
n,
D. et al. (2013), donde realiza=
ron
estudios cinéticos de crecimiento con diferentes formulaciones para la cepa=
de
un lactobacilo probiótico aislado del pulque, determinándose los mejores
resultados de µ=3D 0,056 h-1 y 0,042 h-1.
El recuento de células viables (Log UFC/ml) de L. casei, frente a los diferentes
tratamientos presentaron valores medios de acuerdo a la prueba no paramétri=
ca
de Friedman de: 7,30; 7,86; 5,98 y=
6,66
log UFC/ml; como lo ilustra el gráfico 2, mismos que presentan diferencias
altamente significativas (P<0,01) entre todos los tratamientos. Estas me=
dias
corresponden a los máximos recuentos
alcanzados por el microorganismo durante su crecimiento dentro de los
medios de cultivo enriquecidos con los sustratos en estudio.
Los tratamientos en estado de agitación presentar=
on
los recuentos más altos de células viables, siendo el tratamiento LA, el que
tuvo recuentos cercanos a 108 UFC/ml, ya que como se mencionó
anteriormente, la agitación permite distribuir los nutrientes por todo el
medio, lo que facilita su consumo por parte de las bacterias, con el
consecuente mantenimiento de células vivas durante el proceso fermentativo =
de
la melaza y lactosuero.
Figura 2: Viabilidad de L. casei, frente a los distintos tratamientos: lactosuero estát=
ico
(LE), lactosuero en agitación (LA), melaza estática (ME) y melaza en agitac=
ión
(MA).
Para garantizar recuentos viables satisfactorios,=
se
añadió a los cultivos fosfato de amonio como fuente de nitrógeno y se contr=
oló
la temperatura (34 – 36°C), sin embargo, en este parámetro existen otros
factores que influyen como el incremento en la acidez del medio durante el
proceso fermentativo, el peróxido de hidrógeno producido por algunos
lactobacilos, la composición de los sustratos, el antagonismo entre los
microorganismos por la producción de sustancias antimicrobianas, que hacen
posible el descenso en el recuento de los microorganismos (Londoño, M.
et al., 2008),.. La melaza y el lactosuero fueron sometidos a un proces=
o de
esterilización en una autoclave a 120 °C por 45 minutos (Aguirre, E. et al., 2010) antes de la inoculac=
ión,
para garantizar la ausencia de microrganismos para que no exista antagonism=
o ni
producción de sustancias antimicrobianas.
La presencia de lactosa y proteínas en el lactosu=
ero
hace que las bacterias se mantengan vivas por más tiempo, y la muerte celul=
ar
también está ligada al agotamiento o disminución de uno de los nutrientes;
situación que se evidenció en nuestro trabajo, puesto que los recuentos en =
LA
se mantuvieron similares durante todas las fases de crecimiento bacteriano =
(gráfico
1). La melaza estática arrojó la m=
enor
viabilidad, en un 24% menor con respecto a LA, esto puede ser debido a la baja concentración de azúcares en =
el
medio, situación que se puede corroborar con
Ossa, J., Vanegas, M. y Badillo, A. (2010), quienes evaluaron el
crecimiento de L. plantarum con
diferentes concentraciones de melaza en agitación, donde observaron recuent=
os
viables de 109UFC/ml en=
20% y
25% y se obtuvo recuentos más bajos de 106 y 107 UFC/=
ml,
con las demás concentraciones (5%, 10%, 30%), comparado con la concentració=
n de
melaza empleada en el presente trabajo (8%), es bastante bajo y en consecue=
ncia
la producción de biomasa se ve limitada por deficiencia de fuentes de carbo=
no y
la falta de agitación; en contraste, se tuvo buen crecimiento (µ) en el
tratamiento ME, debido a que las bacterias aprovecharon los nutrientes
presentes, pero al escasearse la fuente de carbono entraron rápidamente a la
fase de latencia y muerte escaseándose la producción de biomasa . El exceso o deficiencia de su=
strato
puede influir en los bajos recuentos celulares (Ossa, J., Vanegas, M. y
Badillo, A., 2010),
Se han realizado trabajos similares para evaluar =
la
viabilidad de varias cepas probióticas, como el desarrollado por Pérez, H y
Hernández, M (2015), donde evaluaron las potencialidades del uso de sustrat=
os a
partir de jugo de Aloe vera (sábila) y coproductos azucareros (glucosa y
melaza) para el crecimiento de Lact=
obacillus
plantarum LB/103-1-5 y obtuvieron una viabilidad superior a 9,0 log UFC=
/ml.
Se Obtuvieron recuentos de células viables de 108, 109 y
1010 UFC/ml en muestras tomadas a las 72 horas en estudios reali=
zados
por Velásquez, J., Giraldo, G., y Padilla, L.
(2012), en el que evaluaron la viabilidad de lactobacillus casei ssp casei ATCC 393 cultivado en suero de le=
che
clarificado en un proceso de fermentación discontinuo. Pese a que los datos
reportados por estos trabajos están por encima de los presentados en la
presente investigación, Aguirre, E. et
al. (2010), recomiendan que la viabilidad debe ser mayor a 6,0 Log UFC/ml para que el
microorganismo pueda ser empleados como cultivo probiótico, en base a lo
mencionado se podría deducir que el tratamiento LA con 7,86 Log UFC/ml, se
encuentra dentro de estos parámetros, de esta manera los microorganismos cultivados en estos
medios pueden emplearse como bacterias probióticas en el desarrollo de
alimentos funcionales donde la supervivencia de la cepa de L.
casei y, por tanto, la vida út=
il del
producto, dependerán entre otros factores, del contenido de ácido (alrededo=
r de
0,65% de ácido láctico) y de una temperatura de conservación menor de 5°C (=
Tamime, A., Marshall, M. y Robinson, R.,1995)
El
rendimiento de biomasa probiótica Yx/sde L. casei, frente a los distintos tratamientos: lactosuero estát=
ico
(LE), lactosuero en agitación (LA), melaza estático (ME) y melaza en agitac=
ión
(MA), presentaron valores medios de rendimiento, según la prueba no paramét=
rica
de Friedman de: 0,16; 0,26; 0,013; y 0,11 Yx/s (g de biomasa/g de
sustrato) ; como lo ilustra el gráfico 3, mismos que difieren
significativamente (P<0,01) entre todos los tratamientos.
El
lactosuero en agitación tuvo el mejor comportamiento en cuanto a rendimient=
o de
biomasa (0,26 g.g-1), nuevamente queda demostrado la importancia=
de
la agitación para el desarrollo favorable de las bacterias lo cual contribu=
ye a
la producción de mayores densidades de biomasa, no sólo por la dispersión de
nutrientes, sino porque favorece la correcta oxigenación del medio, ayuda a
homogenizar las condiciones de temperatura y pH, la dispersión de líquidos
inmiscibles y la suspensión de sólidos (Kazuhiko,T. y Kozo, T.,1995).Un factor que afecta a la
producción de biomasa es la viscosidad (medida de la capacidad que un mater=
ial
tiene para fluir)del medio y que Según Galindo, E., Peña, C. Y Serrano, L. (2007), la viscosidad de =
los
cultivos microbianos se ve afectada por la composición del medio (sólidos
solubles), del tipo de microorganismo (hongos filamentosos, bacterias
productoras de antibióticos, bacterias ácido lácticas, etc.) y de los
metabolitos que producen ciertos hongos o bacterias (polímeros, goma xantán,
etc.), que constituye una dificultad técnica al momento de cultivar
microorganismos en un medio adecuado; éste factor se puede controlar al
adicionar agitación al fluido ya que este movimiento físico permite disminu=
ir
la viscosidad del medio. En la presente investigación, sin embargo, podemos
observar que el mayor componente de los caldos de cultivo es el agua, que t=
iene
baja viscosidad, pero supondría un problema cuando se incrementen los nivel=
es
de melaza en agitación ya que posee una alta viscosidad (500 – 2700 centipo=
ise
a 30°C) en relación al lactosuero.
Figura 3: <=
span
lang=3DES-EC style=3D'mso-bidi-font-size:12.0pt;line-height:115%;font-famil=
y:"Times New Roman",serif;
mso-ansi-language:ES-EC;font-weight:normal'> Rendimiento de biomasa (g de biomasa/g =
de
sustrato), de L. casei, frente =
a los distintos
tratamientos: lactosuero estático (LE), lactosuero en agitación (LA), melaza
estática (ME) y melaza en agitación (MA).
Galindo, E., Peña, C. Y Serrano, L. (2007), también nos menci=
onan
que para optimizar los rendimientos de biomasa se debe lograr que todo (o la
mayoría) del volumen del caldo de fermentación se encuentre bien mezclado
puesto que si no mezclamos bien el líquido existirán zonas “muertas” (de po=
ca o
nula agitación), lo que conducirá a un menor rendimiento y lo recomendable =
para
tener una eficiente agitación en biorreactores es el uso de impulsores de diámetro grande (aunque de giro
lento) antes que los pequeños (de giro rápido), que son lo que se usan en la
mayor parte de los procesos de fermentación industrial.
En definitiva, las células dent=
ro
de un biorreactor pueden tener diferentes comportamientos, tanto en su
morfología como en su fisiología, dependiendo de las condiciones hidrodinám=
icas
en las cuales se cultiven, es así que Bustamante, et al. (2014), concluyeron que la agitación fue un parámetro
importante para obtener una producción de biomasa de 4,5 g/La 43°C.
La
presencia de fosfato de amonio añadido en los medios es un factor que se de=
be
tomar en cuenta ya que según García, C. (2013),
quien observó un aumento en la producción de biomasa al suplementar =
los
medios con fosfato de amonio y lactosa, pero el exceso o deficiencia de est=
os
afectaba a los rendimientos de biomasa; el empleo de lactosa como una fuente
extra de carbono es favorable cuan=
do el
objetivo es obtener buen crecimiento bacteriano pero no cuando se requiere
obtener ácido láctico, por lo que se rescata la importancia de utilizar fue=
ntes
de nitrógeno y carbono de manera equilibrada (para la producción de biomasa=
o
ácido láctico). En la presente
investigación no se utilizó fuentes adicionales de carbono ya que sólo se
consideró las ya presentes en los sustratos naturales, pero se equilibró con
fosfato de amonio (0,8% en el lactosuero y 1 % en la melaza); observando así
que hay productividad con menores concentraciones de fosfato de amonio, por=
lo
que se sugiere que el lactosuero y la melaza son capaces de permitir el
crecimiento bacteriano por sí solos. En los medios LA y LE el incremento de
biomasa está asociado al consumo de lactosa, por lo tanto, se puede conclui=
r la
concentración celular tiene una relación directamente proporcional a la
producción de ácido láctico, mostrando un comportamiento típico de este tip=
o de
metabolito primario asociado al crecimiento microbiano.
Los
coeficientes de rendimiento de biomasa bacteriana Yx/s obtenidos=
en
la presente investigación (0,16 - 0,26 g.g-1), son similares a los
obtenidos por García, C. (2013) con un rendimiento de 0,15 - 0,25; d=
onde
cultivó L. casei en lactosuero
suplementado con lactosa y sulfato de amonio, también Aguirre, E. et al. (2010), reportaron un valor
global promedio de rendimiento de biomasa Yx/s de L. casei que sitúa en 0.0990 y 0.1=
060
(g.g-1) al usar suero=
de
leche de cabra clarificado como
fuente de carbono
Valoración
económica
Todos
los costos de producción se proyectaron para un año, con una capacidad de
producción de la planta de 150 g de biomasa probiótica de L. casei al día, a una escala piloto de 50 litros de medio de
cultivo o sustrato. Los valores que abarcan los costos de producción y el
beneficio - costo de cada tratamiento se puede observar en el (cuadro 3).
Tabla 3:
Análisis Económico.
|
CO=
NCEPTO |
Un=
id. |
Ca=
ntidad |
C.=
U. |
LA=
|
LE=
|
MA=
|
ME=
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2,00 |
6206,63 |
|
|
12413,26 |
12413,26 |
|
|
|
|
|
22283,95 |
22283,95 |
22283,95 |
22283,95 |
|
|
|
|
|
39412,03 |
39412,03 |
|
|
|
Be=
neficio/Costo |
B/=
C |
&n=
bsp; |
&n=
bsp; |
1,630 |
1,009 |
0,379 |
0,314 |
Conclusiones
· =
La mayor velocidad específica de crecimiento (µ) de L. casei se registró en la melaza y
lactosuero en condición de agitación (MA=3D 0,087 y LA=3D 0,026 h-1),
evidenciando que la agitación es la mejor condición para el crecimiento de =
L. casei; y que los microorganismos
realizan sus actividades metabólicas dentro de estos medios de cultivo a ba=
se
de sustratos naturales, con cantidades mínimas de fosfato de amonio y con
temperatura controlada entre 34-36 ºC.
· =
El uso de lactosuero como sustrato para el desarrollo de
microrganismos probióticos, influenciado directamente por la agitación, fue=
el
mejor tratamiento para obtener recuentos de células viables mayores a 10
· =
El mejor resultado en cuanto a rendimiento de biomasa Y=
x/sde
L. casei, se obtuvo con el medi=
o a
base de lactosuero y en agitación de 0,26 g.g-1 y a la vez regis=
tró
la mayor producción de biomasa de 2,5 g/Lt, comprobándose una vez más que el
tratamiento LA, es el más idóneo para obtener biomasa bacteriana.
· =
En cuanto al análisis económico, se obtuvo un beneficio
costo de 1,63 en el tratamiento lactosuero en agitación; que significa que =
por
cada dólar invertido se tiene una utilidad de 0,63 centavos de dólar, lo que
indica que producir biomasa bacteriana con este tratamiento podría ser una
actividad <=
span
lang=3DES-EC style=3D'mso-bidi-font-size:12.0pt;line-height:150%;font-famil=
y:"Times New Roman",serif;
mso-ansi-language:ES-EC;font-weight:normal'>rentable.
1.
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PARA CITAR EL ARTÍCULO
INDEXADO.
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style=3D'font-family:"Times New Roman",serif;font-weight:normal;mso-bidi-fo=
nt-weight:
bold'>Barrazueta Rojas, S., Yánez Tisalema, G., Mendoza Zurita, G., & Lara Freire, =
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/10.33262/cienciadigital.v3i3.4.843
El artículo que se publica es de exclusiva responsabilidad de los
autores y no necesariamente reflejan el pensamiento de la Revista Ciencia Digital.
El artículo queda en propiedad de la revista y, por
tanto, su publicación parcial y/o total en otro medio tiene que ser autoriz=
ado
por el director de la Revista Cien=
cia
Digital.
[1] Escuela Superior Politécnica de Chimborazo, Facultad de
Informática y Electrónica, Chimborazo, Ecuador, sbarrazueta@espoch.edu.ec
[2] Escuela Superior Politécnica de
Chimborazo, Chimborazo, Ecuador, geo_ti@yahoo.es
[3] Avícola Don Guillo, Chambo -
Ecuador, guillomendoza01@yahoo.com
[4] Escuela Superior Politécnica de
Chimborazo, Facultad de Informática y Electrónica, Chimborazo, Ecuador, leticia.lara@espoch.edu.ec
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style=3D'mso-spacerun:yes'> =
Vol. 3, N°3.4, p. 152 - 166, septiembre, 201
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