Determinación de control
microbiológico de pseudomona en máscaras de pestañas e=
n la
ciudad de Cuenca
Determination of microbiological
control of pseudomona in eyelash mascaras in the city of Cuenca
![](3D"08DayanarhaAguileraUCCANATOMIA_archivos/image003.gif")
![3D"Interfaz](3D"08DayanarhaAguileraUCCANATOMIA_archivos/image004.jpg")
|
1 |
Dayanarha Zoilanhy Aguilera Bu=
ele |
|
https://orcid.org/0009-0005-5187-970X |
|
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Universidad Católica de
Cuenca, Cuenca, Ecuador |
|||
|
2 |
Tania Valeria Figueroa Figuero=
a |
|
https://orcid.org/0009-0000-0667-8435 |
|
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|
Universidad Católica de
Cuenca, Cuenca, Ecuador
|
|||
|
3 |
María Viviana Araujo
Campoverde |
|
https://orcid.org/0009-0003-85=
57-
8214 |
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Universidad Católica de
Cuenca, Cuenca, Ecuador |
![](3D"08DayanarhaAguileraUCCANATOMIA_archivos/image005.gif")
Artículo de Investigación
Científica y Tecnológica Enviado: 16/11/2023 Revisado: 14/12/2023 Aceptado: 20/01/2024 Publicado:06/02/2024 &=
nbsp;
DOI: <=
span
lang=3DEN-US style=3D'mso-ansi-language:EN-US'>https://doi.org/10.33262/a=
natomiadigital.v7i1.1.3005 <=
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style=3D'mso-spacerun:yes'> <=
span
lang=3DEN-US style=3D'font-family:"Times New Roman",serif;mso-fareast-fon=
t-family:
"Times New Roman";mso-ansi-language:EN-US;mso-fareast-language:EN-US'> C&i=
acute;tese:
Aguilera Buele, D. Z., Figueroa Figueroa , T.=
V.,
& Araujo Campoverde , M. V. (2024). Determinación de control
microbiológico de pseudomona en máscaras de pestañas=
en
la ciudad de Cuenca . Anatomía Digital, 7(1.1), 117-130. https://doi=
.org/10.33262/anatomiadigital.v7i1.1.3005 La
revista es editada por la Editorial Ciencia Digital (Editorial de prestig=
io
registrada en la Cámara Ecuatoriana de Libro con No de
Afiliación 663) www.celibro.org.=
ec Esta revista está protegida bajo una
licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0
International. Copia de la licencia: https://creative=
commons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/deed.es Palabras claves: Pse=
udomona
sp, Máscaras de pestañas, Cuenca, NSO, importación Resumen Int=
roducción:
La
microbiología cosmética es aquella que garantiza la inocuid=
ad
de los productos cosméticos, la presencia de patógenos
nosocomiales como Pseudomona debería ser nulo, sin embargo, el mal
control de las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) durante la
manufactura del maquillaje puede generar contaminación por este
microorganismo y poner en riesgo la salud del consumidor. Por lo tanto, la FDA resalta la
importancia de realizar pruebas microbiológicas a todo producto
destinado para el uso humano. Ob=
jetivo:
Determinar la calidad microbiológica de máscaras de
pestañas que se expenden en Cuenca, para observar si cumple con los
límites máximos permitidos según la Notificaci&oacut=
e;n
Sanitaria Obligatoria (NSO) colombiana para Pseudomona. Metodología: Se realizó un estudio experimental
puro, en 5 marcas de máscaras de pestañas diferentes aplica=
ndo
las pautas dadas por la FDA para un análisis microbiológico=
. La
identificación de Pseudomona sp se dio con base en las pruebas de
identificación realizadas en el laboratorio. Resultados: Se analizó un total de 5 marcas de
máscaras de pestañas de las cuales, 2 son marcas ecuatorian=
as y
3 marcas importadas. Teniendo en cuenta que solo una de las marcas import=
adas
presentó crecimiento positivo para Pseudomona sp esto se
confirmó mediante el análisis microbiológico, con la
aplicación de medios de cultivo y pruebas específicas,
además de un análisis estadístico de las variables
mediante la aplicación IBM SPSS 26. Conclusión: La identificación de Pseudomona en =
la
marca de máscaras de pestañas señala un incumplimien=
to
en la NSO, indicando la falta de calidad y seguridad en su aplicaci&oacut=
e;n.
Tipo de artículo: Original. Área de estudio o rama de la ciencia: Bioquímic=
a y
Farmacia Keywords: Pseudomonas, eyelash mascaras, Cuenca, NSO,
import Abstract Introduction:
Cosmetic microbiology oversees guaranteeing the safety of cosmetic produc=
ts;
the presence of nosocomial pathogens such as Pseudomonas should be null;
however, poor control of Good Manufacturing Practices (GMP) during the
manufacture of makeup can generate contamination by this microorganism and
put the consumer's health at risk. Therefore, the FDA emphasizes the
importance of performing microbiological tests on all products intended f=
or
human use. Objective: To det=
ermine
the microbiological quality of mascaras sold in Cuenca, observing if they
comply with the maximum limits allowed according to the Colombian Mandato=
ry
Health Notification (NSO, by its Spanish acronym) for Pseudomonas. Methodology: A pure experimental
study was conducted on five different mascara brands, applying the guidel=
ines
given by the FDA for a microbiological analysis. The identification of
Pseudomonas sp was based on identification tests performed in the laborat=
ory.
Results: Five mascara brands=
were
analyzed, including two Ecuadorian and three imported brands. Considering
that only one of the imported brands showed growth for Pseudomonas sp, th=
is
was confirmed through microbiological analysis, using culture media, spec=
ific
tests, and statistical analysis of variables using IBM SPSS 26. Conclusion: Identifying Pseudom=
onas
in the mascara brand indicates non-compliance with the NSO, indicating the
application’s lack of quality and safety. Introducció=
n Pseudomona
aeruginosa es una
bacteria oportunista, bacilo gram negativo, que está presente en
diversos nichos ecológicos y ha evolucionado para producir pigmentos
gracias a la capacidad que tiene para aprovechar el hierro presente en su
entorno (1). Este patógeno está implicado en infecciones
nosocomiales las cuales pueden llegar a ser fatales en personas
inmunocomprometidas (1). Las pautas indicadas por la FDA explican que no
debería existir crecimiento de
Pseudomona aeruginosa en
cosméticos, ya que este es un factor para que los productos sean
retirados del mercado (2), esto debido a la capacidad de formar biofilms que
protegen a la bacteria, otorgándole la resistencia a conservantes o
preservantes (3), A los productos contaminados con Pseudomona se los relaciona con la ausencia de higiene por parte
del personal de manufactura de los rímeles, esto debido a que este
microorganismo es un saprófito de la piel (4). Según el autor Jaló=
;n-Ortiz
(4) en su estudio sobre reacciones oculares producidas por cosmético=
s en
el año 2017, establece que la máscara de pestañas y
delineador son los productos más usados por parte de la poblaci&oacu=
te;n
en general sin embargo estos llegan a generar crecimiento de diversos tipos=
de
colonias bacterianas (5), el estudio demostró que el tiempo de uso d=
el
producto reduce el conservante empleado lo que puede llegar a producir una
infección ocular por crecimiento de patógenos (3). Se han
reportado casos de infecciones corneales y queratitis ocular producidas por
laceraciones al momento de usar el cepillo del rímel contaminado, es=
to
puede generar un riesgo para la visión de los consumidores (6). En la
Unión Europea, aproximadamente 173 productos cosméticos han s=
ido
retirados, de estos 24 por contaminación con P. aeruginosa (7). La FDA resalta la importancia de llevar a ca=
bo
estudios microbiológicos para detectar la presencia de Pseudomonas en cosméticos =
(8, 9). En Ecuador, el Plan Nacional de Salud se enfoca en abord=
ar
la resistencia microbiana presente principalmente en hospitales y centros de
salud, haciendo hincapié en el control deficiente de las infecciones
nosocomiales (10). A pesar de utilizar betalactámicos para tratar
infecciones por P. aeruginosa, =
se ha
observado resistencia a este antibiótico desde 2017, con un aumento
progresivo en los años subsiguientes (10) demostrando que, las
iniciativas para frenar la resistencia antimicrobiana son ineficaces hasta =
el
momento (10). En nuestro país, no es obligatorio realizar prueb=
as
microbiológicas para comprobar si los cosméticos están
cumpliendo los parámetros de manufactura establecidos, únicam=
ente
se guían en los requisitos solicitados por la NSO colombiana. Esta
normativa establece límites mínimos y máximos de
crecimiento, sin embargo, no estandariza los procesos para llevar un control
correcto. En la ciudad de Cuenca-Ecuador, ciertas distribuidoras de maquill=
aje
están teniendo un incremento en ventas por los bajos precios en los =
que
se oferta el maquillaje, por lo que se busca determinar la calidad
microbiológica de máscaras de pestañas que sean expedi=
das
en la ciudad de Cuenca y determinar si cumplen con lo establecido en la
normativa. Metodología=
El presente estudio es de carácter experimental p=
uro,
aplicando un enfoque de muestreo no probabilístico, se desarroll&oac=
ute;
en el periodo de Julio del 2023. El procedimiento se realizó en 5
diferentes marcas de máscaras de pestañas, de las cuales 2 son
marcas ecuatorianas y 3 son marcas importadas. El procedimiento experimenta=
l se
llevó a cabo según los parámetros especificados por la=
FDA
en el Bacteriological Analytical Ma=
nual (BAM) (Capítulo 23), donde se
encuentra definida la metodología de muestreo para productos cosm&ea=
cute;ticos
a base de aceite y crema. Técnicas de
experimentación y selección de datos Se obtuvieron 5 rímeles en varios locales y
distribuidoras de la ciudad de Cuenca, los cuales eran de diferente marca y=
el
estilo del empaque era distinto, los mismos que se llevaron a los laborator=
ios
de microbiología de la Universidad Católica de Cuenca para ser
analizados. Muestra recolectada Siguiendo lo indicado en el capítulo 23 de la FDA=
, se
analizaron las 5 máscaras de pestañas. Se prepara una
disolución 10 -1, en condiciones totalmente asépticas del cua=
l se
extrajo 1 mL de máscara de pestañas y se colocó en tub=
os
tapa rosca preparados previamente con 1 mL de Tween 80. Las muestras deben =
ser
homogeneizadas en un vortex antes de colocar 8 mL de caldo Letheen Broth Base modified (MLB). Se incuban a 37°C por 24
horas (11). Lectura de resultados De las 5 marcas obtenidas, sólo una present&oacut=
e; crecimiento
de bacilos gram negativos, oxidasa positivos. Por lo que se procede a compr=
ar 4
máscaras de pestañas de la misma marca, pero diferente lote en
diferentes distribuidoras de la ciudad y repetir el procedimiento indicado =
por
la FDA, BAM 23. Identificación de Pseudom=
ona
aeruginosa El caldo Letheen modificado tiene las propiedades necesa=
rias
para neutralizar los conservantes de los productos cosméticos y gene=
rar
un crecimiento bacteriano exitoso (12). Los tubos se cultivaron por 24 hora=
s a
35°C. El cultivo microbiológico directo se realizó en agar
Cetrimida el mismo que es específico y diferencial para Pseudomona. Con un asa esté=
ril se
inocula el cultivo del caldo Letheen y se siembra por agotamiento en el agar
cetrimida, los medios se cultivaron por 24 horas a 35°C dando resultados
positivos de crecimiento bacteriano. Al someterlo a luz ultravioleta se obs=
erva
la presencia de fluorescencia verde brillante, como se muestra en la figura 1. Para corroborar el resultado de Pseudomona se realizó la prueba de oxidasa, y se
sembró en agar TSI (Triple S=
ugar
Iron), Macconkey, Citrato y Muller Hilton. Análisis estadísti=
co El análisis estadístico se realizó
mediante el uso de la aplicación IBM SPSS 26 de todas las muestras
analizadas con las variables: Pseud=
omona
sp, contenido del producto, notificación sanitaria, estado del
empaque; se realiza una vez culminado el análisis microbiológ=
ico;
esto con el objetivo de determinar la influencia de cada variable antes
mencionada sobre la presencia o no de Pseudomona.
Para esto se analizaron estadísticamente las 9 muestras que presenta=
n o
no crecimiento en el análisis microbiológico, sin
parámetros de exclusión. Resultados Para validar el crecimiento obtenido en el agar cetrimid=
a se
realizaron pruebas confirmatorias para Pseudomona,
recalcando la positividad de la prueba de la oxidasa. El agar TSI se usa pa=
ra
aislar bacilos gram negativos, los cuales se diferencian por el cambio de c=
olor
en el medio, en el caso de Pseudomo=
na el
medio cambia su pH por la forma en la que esta bacteria asimila los compone=
ntes
nutricionales, generando un viraje del medio a rojo, así mismo, no es
productora de gas, ni productora de ácido sulfúrico, como se
observa en la figura 3b.
Figura 1. a. Agar Cetrimida: Crecimiento
positivo, coloración verde del medio. b. Exposición a luz UV =
con
fluorescencia positiva El agar Macconkey ayuda a distinguir bacterias fermentad=
oras
de lactosa, las cuales tienen un crecimiento significativo de colonias rosa=
das
(13,14,15). Las especies de Pseudom=
ona
no fermentan lactosa lo que ocasiona un crecimiento de colonias transparent=
es o
cafés, como se muestra en la figura 2. Figur=
a 2. Agar Mackonkey: Colonias redond=
as
brillantes color café. Desprende pigmento al medio. Las bacterias que usan citrato como única fuente =
de
carbono suscita un cambio de coloración a azul en el agar citrato de
Simmons, como se puede observar en la figura 3a. Figur=
a 3. a. Agar Citrato Simmons
coloración del medio azul. b. Agar TSI coloración del medio R=
oja El agar Muller Hilton es usado para ver el crecimiento
bacteriano y la coloración características de Pseudomona, que producen pigmentación verdosa la cu=
al se
difumina al medio, como se puede observar
en la figura 4. Figur=
a 4. Agar Muller Hilton Después de realizar el análisis
microbiológico de las diferentes muestras, se confirma el resultado positivo para Pseudomona sp en una marca extranj=
era. Análisis Estadísti=
co Se analiza el porcentaje de cada variable independiente
(tabla 2, 3, 4) con respecto a la presencia o no de Pseudomona variable dependiente (tabla 1) en las 9 muestras de
máscaras de pestañas.
Tabla
1. Resultado de análisis estadístico de la variable
Pseudomona sp. Pseudomona sp. Frec=
uencia Porc=
entaje Porc=
entaje
válido Porc=
entaje
acumulado lido=
Pres=
encia 5 55.6% 55.6 % 55.6% Ause=
ncia 4 44.4% 44.4% 44.4% Tota=
l 9 100.00% 100.00% Del
total de 9 muestras analizadas, el 55.6% de la muestra (5 máscaras)
presentan la presencia de Pseudomon=
a, mientras
que el 44.40% (4 máscaras) no presentan dicha bacteria, lo cual
señala que la mayoría de la muestra presentó crecimien=
to
de Pseudomona. Tabla
2. Resultado de análisis estadístico notificación
sanitaria Notificación Sanitari=
a Frecuencia Porcentaje Porcentaje válido Porcentaje acumulado V&aa=
cute;lido Sin
notificación sanitaria 5 55.6% 55.6% 55.6% Con
notificación sanitaria 4 44.4% 44.4% 44.4% Tota=
l 9 100.00% 100.00% 100.00% En la tabla 2 se describe el
análisis en cuanto a la variable notificación sanitaria, del
total analizado, el 55,6% (5 máscaras) no cuentan con
notificación sanitaria, sin embargo, el 44,40% del total de las mues=
tras
(4 máscaras) cuentan con notificación sanitaria por lo que la
variable notificación sanitaria afecta significativamente a la prese=
ncia
o no de Pseudomona sp (tabla 1)=
. Tabla
3. Resultado de análisis estadístico de la
variable estado del empaque Estado del empaque Frec=
uencia Porc=
entaje Porc=
entaje
válido Porc=
entaje
acumulado V&aa=
cute;lido Cerr=
ado 9 100.00% 100.00% 100.00% En cuanto a la variable estado d=
el
empaque (tabla 3), muestra que el 100% de muestras (9 máscaras) cuen=
tan
con empaques cerrados, por tanto, esta variable no es influyente en la
presencia o no de Pseudomona sp
(tabla 1). Tabla
4. Resultado de análisis estadístico de la
variable contenido neto del producto Contenido neto del producto<=
o:p> Frecuencia Porcentaje Porcentaje válido Porcentaje acumulado Válido 7ml 6 66.7 66.7 66.7 10ml 3 33.3 33.3 33.3 Total 9 100.00% 100.00% 100.00% En
la variable de contenido neto del producto (tabla 4), señala que el
66,7% (6 máscaras) del total de las muestras (9 máscaras),
contiene 7 ml, y que el 33.3% (3 máscaras) contienen 10 ml, por tant=
o, esta
variable no influye en la presencia o ausencia de Pseudomona sp (tabla 1). Discusión La máscara de pestaña es el producto
más usado a nivel de cosméticos oculares, según varios
estudios realizados por
Jalón-Ortiz (4) y Bashir & Lambert (16), en el estudio Microbiological study of used cosmetic
products: highlighting possible impact on consumer health realizado en el año 2020, ll=
egaron
a la conclusión de que es necesario realizar estudios
microbiológicos en los cosméticos, ya que estos aumentan la
proliferación bacteriana una vez abierto el empaque y durante el tie=
mpo
de uso (4). Por lo tanto el tiempo de uso, una vez abierto afecta directame=
nte
a la concentración y efectividad de conservantes empleados en su
formulación contra el desarrollo microbiano, generando que los
cosméticos sean un peligro para la salud (3). El presente estudio se
basó en determinar si los rímeles (máscaras de
pestañas) que son comercializados en Cuenca, cuentan con los
límites máximos permitidos según la NSO colombiana, pa=
ra
ello, el estudio se dividió en dos etapas, la primera fue una fase
exploratoria en la que se analizan 5 marcas de pestañas “A, B,=
C,
D, E”, en esta se realiza un estudio microbiológico siguiendo =
lo
indicado en la FDA y se confirma un resultado positivo para Pseudomona en una marca extranjera=
(E)
la misma que, a pesar de que el empaque llega cerrado, no cuenta con
notificación sanitaria pertinente. Así mismo se realizan distintas pruebas las cuales
confirman el resultado de Pseudomona
aeruginosa y se procede a la segunda parte del estudio o fase
comprobatoria. Para ello, se obtienen 4 máscaras de pestañas =
de
la misma marca “E”, de distintos lotes y recolectadas en difere=
ntes
puntos de la ciudad “E1, E2, E3, E4”. De este modo se procede a
repetir el procedimiento indicado por la FDA y se obtiene que en las 4 mues=
tras
de rímeles el crecimiento de la bacteria da positivo para Pseudomona aeruginosa. Pseudomona es un
microorganismo nosocomial con factores genéticos que favorecen una
invasión patógena corneal, inclusive llegan a invadir el estr=
oma
corneal (3). La queratitis ulcerativa es una infección ocular que pu=
ede
ser causada por Pseudomona, esta
enfermedad es de alto riesgo para el ojo, siendo una de las principales
causantes de pérdida de la visión a nivel mundial (3). Sin embargo para que una
infección por este microorganismo ocurra debe existir una lesi&oacut=
e;n
previa en el ojo, esta bacteria tarda 24 horas en producir una infecci&oacu=
te;n
y menos de una semana en perforar la córnea (7). La incorrecta
manipulación del rímel puede conllevar a que el consumidor
lesioné la córnea con el cepillo (7). Las enfermedades visual=
es
ocasionadas por este microorganismo son difíciles de tratar debido a=
que
este patógeno tiene la capacidad de formar biofilms que sirven de
barrera contra los agentes antimicrobianos, generando resistencia al
antibiótico e imposibilitando acabar con la infección (3). Para que un cosmético sea seguro para el uso huma=
no
debe haber sido elaborado en empresas que tengan buenas prácticas de
manufactura (BPM), así mismo se debe realizar análisis
fisicoquímicos y microbiológicos para que no represente un
peligro (3). La microbiología cosmética es aquella que
evalúa la calidad microbiológica de los productos evitando qu=
e se
produzca un deterioro prematuro de la formulación (3). Un producto
cosmético puede llegar a contaminarse en las etapas de
fabricación o envasado ya sea por la incorrecta limpieza de equipos o
del propio personal, para que esto no suceda los operarios encargados deben
estar al tanto de las normas de higiene y de las BPM impuestas por la empre=
sa
(3). En Ecuador, se importan cosméticos los cuales no
constan con estudios microbiológicos necesarios para ser considerado=
s un
producto de calidad, el hecho de que no registren una notificación
sanitaria y puedan ser comercializados en varias distribuidoras, pone en ri=
esgo
la salud de los consumidores. La NSO establece los requisitos y procedimien=
tos
que deben cumplir los productos cosméticos para ser comercializados =
en
la subregión Andina (17). De esta forma se puede llevar un control y
vigilancia en el mercado y asegurar la salud humana (17). Sin embargo el
certificado que se solicita debe contener información aprobada por la
autoridad local declarando al producto como competente ante el cumplimiento=
de
las condiciones técnicas, locativas e higiénico sanitarias (1=
7). Así es como la Resolución N° 2120 del
Reglamento Andino sobre especificaciones técnicas microbiológ=
icas
de productos cosméticos aprueba productos cosméticos que hayan
cumplido con los parámetros fisicoquímicos y estén lib=
res
de contaminación microbiológica (17). Determinando que los
productos cosméticos para el uso del área de los ojos o que
entren en contacto con membranas mucosas deben tener ausencia de Pseudomona aeruginosa en 1 g o ml =
de
producto. En este caso se presenta contaminación en varios productos=
de
la marca “E” por Pseudo=
mona
aeruginosa, siguiendo lo indicado por la NSO, esta marca no es adecuada
para el uso humano. Conclusiones ·
Es
importante destacar que Pseudomona<=
/i> es
un género de bacterias que pueden ocasionar infecciones oculares al
entrar en contacto con los ojos. La NSO colombiana como norma de salud,
establece estándares y requisitos para garantizar la seguridad y la
calidad de las máscaras de pestañas; señalando que la
presencia o crecimiento de Pseudomo=
na
en estos productos debería ser nula. ·
La
presencia de Pseudomona sp en la
marca de los productos analizados (máscaras de pestañas), se =
da
por una ausencia del cumplimiento de la normativa NSO, lo que indica un
incumplimiento en las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) por parte
del personal de la fábrica ·
Lo
relevante de esta investigación es recalcar la importancia de realiz=
ar
análisis microbiológicos a toda marca de cosméticos que
ingrese al país, más aún si estos son productos que en=
tran
en contacto con mucosas. De esta forma se preserva el bienestar del consumi=
dor. Conflicto de inter=
eses Nosotras, Dayanarha Zoilanhy Aguilera Buele, Tania Valer=
ia
Figueroa Figueroa y Maria Viviana Araujo Campoverde declaramos que no existe
ningún conflicto de interés en el desarrollo del proyecto
“Determinación de Control Microbiológico de Pseudomona =
en
Máscaras de Pestañas en la ciudad de Cuenca”, aseguramos
que nuestra imparcialidad no se verá comprometida en ninguna
decisión o acción relacionada al proyecto. Declaración=
de
contribución de los autores Las autoras Dayanarha Aguilera, Tania Figueroa y Viviana
Araujo han participado activamente en la organización, diseño=
e
interpretación de resultados. Asimismo, formaron parte del desarroll=
o y
análisis experimental. Las mismas que revisaron críticamente =
la
versión final del trabajo y están de acuerdo con su
publicación en la revista Anatomía digital. Referencias Bibliográfica=
s 1.&n=
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17. El artículo que se publica es de exclusiva
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