Introducción
La zoonosis es definida por la Organización Mundial de la Salud (OMS)
como toda enfermedad transmitida naturalmente del animal al hombre.
Actualmente, la cría, venta y exportación de animales de consumo
fomentan las principales fuentes de transmisión de microorganismos
causantes de zoonosis, uno de los más importantes hoy en día es
Staphylococcus aureus (1).
Staphylococcus aureus es una bacteria cocoide gram
positiva de importancia clínica debido a su capacidad de colonizar
células del hospedero por sus factores de virulencia y,
consecuentemente, conllevar a patologías graves (2). A más de ello, la
importancia radica en la amplia resistencia a fármacos como penicilinas,
linconsamidas y estreptograminas (3).
La estrecha interacción entre el hombre y el animal por el aumento de
la actividad comercial conlleva al incremento de las fuentes de
transmisión de enfermedades ligadas a la manipulación y contaminación
con microorganismos, como el caso concreto del S.
aureus. Este último puede llegar a provocar diferentes
infecciones en los pollos, generalmente asociadas a huesos y
articulaciones, que alteran el crecimiento y desarrollo normal de las
aves que están destinadas al consumo humano (1).
La infección por S. aureus en aves se llega a
manifestar mediante hinchazón, fiebre, lesiones, abscesos plantares,
necrosis de tejidos, etc., lo cual vuelve inútil la crianza de dichos
pollos y conlleva a pérdidas económicas para la empresa avícola. Además,
si estas aves infectadas llegaran a ser comercializadas para su
posterior faenamiento, representarán un riesgo de intoxicación
alimentaria para los humanos, debido a que esta bacteria puede llegar a
producir un elevado número toxinas perjudiciales para la salud del
consumidor (4,5).
Staphylococcus aureus es un tipo de bacteria que
causa infecciones comunes en ambiente hospitalario y comunitario. Aunque
existen más de 30 especies de estafilococos, la mayoría de las
infecciones son causadas por S. aureus. Esta bacteria
es parte de la microbiota normal de la piel y se encuentra
principalmente en las fosas nasales, siendo así el contacto directo la
forma más común de transmisión y las manos juegan un papel importante en
su propagación de la piel y mucosas (6).
S. aureus ocasiona una gran variedad de afecciones
médicas, desde lesiones cutáneas y de tejidos blancos (como infecciones
en heridas, abscesos, celulitis, foliculitis, forunculosis e impétigo
ampollar) hasta patologías más graves y sistémicas (como artritis
séptica, bacteriemias, endocarditis, neumonía, osteomielitis e
infecciones posoperatorias que involucran prótesis óseas y articulares).
Además, las toxinas liberadas por este microorganismo son responsables
del síndrome del shock tóxico, el síndrome tóxico alimentario y el
síndrome de la piel escaldada (6).
El tratamiento de elección para las afecciones causadas por
S. aureus radica en el empleo de antibióticos
betalactámicos. Sin embargo, poco después de emplear la meticilina como
tratamiento en 1961, aparecieron ya las primeras cepas de
Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina
(SARM). El nivel de resistencia ha incrementado drásticamente con el
paso del tiempo debido a los genes de amplia recombinación y
transmisión, afectando el tratamiento frente a este patógeno (7).
La resistencia a la meticilina en los estafilococos se atribuye a una
proteína de unión a penicilina de baja afinidad PBP2a, codificada por el
gen mecA (8). Dicha resistencia se debe a que los
antibióticos β-lactámicos son incapaces de inhibir la PBP2a, la cual es
capaz de mantener intacta la pared celular a lo largo del crecimiento y
división celular en comparación a otras PBP de S.
aureus que si son inhibidas (9).
El gen mecA se encuentra en un elemento genético
móvil denominado case cromosómico estafilocócico mec (SCCmec) que se
incorpora en un lugar determinado del cromosoma bacteriano (attBSCC)
cerca del origen de replicación de S. aureus. Es de
mucha importancia debido a que le permite tener una replicación temprana
y reproducir los genes de resistencia adquiridos (10).
De acuerdo con la OMS la probabilidad de mortalidad en pacientes con
infecciones por S. aureus resistente a la meticilina es
un 64% mayor que en paciente con infecciones sensibles a los
medicamentos. Además, en 2017 fue incluido en su lista de los doce
patógenos más peligrosos debido a su resistencia a los antibióticos.
Esto destaca la gravedad de las infecciones por SARM y la necesidad de
abordar esta resistencia (11).
El Ministerio de Salud Pública (MSP) publicó la frecuencia de los
microorganismos sujetos a vigilancia mayormente reportados anualmente en
hospitales de Ecuador con la ayuda del sistema informático Whonet. De
acuerdo a este informe, se reportaron 2.940 aislados de S.
aureus en 2014, 3.820 en 2015, 4.585 en 2016 y 5.518 en 2017,
observándose un claro aumento de casos por dicha bacteria (12).
De esta manera, las infecciones provocadas por los SARM se consideran
como un causante del problema de salud que eleva costos (estadía
hospitalaria) e incrementa tasas de morbilidad y mortalidad. Tanto en
Estados Unidos, Japón, Europa y algunas regiones de Latinoamérica se
reporta que alrededor del 40% de aislamiento de S.
aureus son resistentes a meticilina (13).
Si bien las bacterias MRSA frecuentan los entornos hospitalarios, se
ha demostrado la infección por MRSA en personas que no han tenido
contacto con este ambiente, por lo que dicha infección podría ser más
común de lo que se estima debido al contacto o ingesta de animales
domésticos o silvestres posiblemente contaminados (2).
Un estudio realizado en Tanzania, enfocado en la transmisión de
S. aureus en humanos, pollos, roedores y suelo dentro
del entorno doméstico, determinó la elevada frecuencia de S.
aureus con un porcentaje del 50,5%, con una mayor prevalencia
en los roedores y en el suelo. En cuanto a susceptibilidad se observó
resistencia a tetraciclina, clindamicina y eritromicina. Por tanto, se
deduce que la presencia de estas bacterias antibiótico resistentes,
constituye un reservorio potencial de fácil transmisión a humanos y
animales de compañía (14).
En Etiopía, mediante un estudio transversal desarrollado en el
personal, pollos aparentemente sanos y en cama de granjas avícolas en
Addis Abeba, se reportaron 64 de 222 muestras como positivas para el
género Staphylococcus. De estas a su vez se
identificaron 40 positivos para S. aureus, 11 para
S. hyicus, 3 para S. intermedius y 10
para estafilococos coagulasa negativos (SCN) (15).
En Estados Unidos en el 2010 se encontró que el 8% de pacientes
ambulatorios con presencia de enfermedades recurrentes diagnosticados
con Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina
(SARM) guardan contacto directo con mascotas (16).
Según un análisis realizado en Nigeria, del cual se tomaron 1 300
muestras de pollos, se reportó S. aureus en 660 de
ellas, de las cuales 211 fueron provenientes de pollos de engorde, 231
de ponedoras y 218 de locales. Así mismo, 89 muestras fueron aisladas de
pollos entre 0 - 4 semanas, 161 de 5-10 semanas y 410 de pollos de más
de 10 semanas de edad (17).
En Argentina, en la ciudad de Salta, se realizó la inspección clínica
de cuatro pollos parrilleros provenientes de una granja, posterior a la
toma de muestra y cultivo de secreción nasal y exudado de las
articulaciones, mediante tinción de Gram se determinó la presencia de
cocos Gram positivos en forma de racimos. Luego de su siembra en agar
manitol salado, se determinó la presencia de S. aureus
(18).
En un estudio realizado en Perú en pollos de los cuales se tomó
muestra de cornetes nasales, senos infraorbitales, sacos aéreos entre
otros, se aislaron 97 cepas de S. aureus de las cuales aproximadamente
el 28 % (28/97) poseían resistencia a la meticilina (2).
En un estudio llevado a cabo en el cantón Guaranda, Bolívar Ecuador,
se analizaron 170 muestras de leche de vaca de diversas fincas, en las
cuales se observó crecimiento de microorganismo luego de su cultivo en
el 39.4% (n=67). De estas últimas, en el 55.2% se observó presencia de
S. aureus y en el 6 % de
Staphylococcus spp. En el porcentaje restante se pudo
evidenciar crecimiento de otros como Bacillus spp.
(Klebsiella spp., Shigella spp.,
Streptococcus spp., Escherichia coli y
Enterobacter spp) (19).
En Ecuador existe poca evidencia sobre la presencia de S.
aureus en aves de corral. No se han encontrado estudios
referentes a Staphylococcus aureus en pollos vivos en
la provincia del Azuay y regiones aledañas. En gran medida los estudios
se enfocan en ganado vacuno y cerdos. Considerando la importancia para
el sistema sanitario del control de enfermedades transmitidas por
S. aureus, el presente estudio se enfoca en determinar
la frecuencia.
A nivel nacional, la evidencia reportada frente a esta problemática
es muy escasa, ya que son puntuales las investigaciones enfocadas en la
presencia de S. aureus en aves de corral, por lo cual
el presente estudio pretende; “Determinar la frecuencia de
Staphylococcus aureus y susceptibilidad antimicrobiana
aislado de narinas de pollos de crianza en Jadán – Ecuador.
Metodología
Universo de estudio, tratamiento muestral y
muestra
El universo de estudio lo conforman 1000 pollos de crianza de un
criadero de Jadán – Ecuador cuya edad de crianza comprende los 49 días.
Se realizó un muestreo de tipo no probabilístico por conveniencia. La
muestra se conformó por 60 aislados, los cuales se trabajaron por
duplicado a partir de hisopado superficial de las narinas de los pollos
de crianza.
Métodos, técnicas e instrumentos de investigación o
recolección de datos
Toma de muestra: Al no existir una normativa o esquema
del procedimiento a seguirse en las guías acerca de la toma de muestras
en las narinas de pollos, con la finalidad de obtener una muestra
representativa de las narinas, se emplearon hisopos estériles y se
frotaron por la parte externa de las narinas. De igual manera, se tomó
muestra de la secreción de las narinas, mismas que se introdujeron
rápidamente en 5 ml caldo tripticasa soya. Las muestras se trasladaron
al laboratorio de microbiología de la facultad de Bioquímica y Farmacia
y se incubaron a 37°C durante 24 horas.
Identificación de Staphylococcus
aureus: Se realizó la siembra de las 60 muestras en agar
Manitol Salado. Esta se llevó a cabo mediante estrías, abarcando la
mayor superficie del agar. Se incubó por un periodo de 48 horas a 37°C.
Pasado este tiempo se escogieron las unidades formadoras de colonia
(UFC) que denotaran compatibilidad con S. aureus,
fermentando el manitol, produciendo una acidificación del medio y dando
un viraje de rojo a amarillo. A partir de las colonias fermentadoras de
manitol se realizaron cuatro pruebas microbiológicas; tinción de Gram,
catalasa, coagulasa y DNAsa (2).
Susceptibilidad antimicrobiana: Se realizó un
antibiograma mediante la técnica Kirby Bauer o disco difusión, este
procedimiento se llevó a cabo según los lineamientos establecidos en el
CLSI, 2021. Se tomaron entre 4 a 6 colonias con un asa estéril y se
diluyó en solución salina hasta alcanzar una turbidez de 0.5 de la
escala MacFarland. Posteriormente se introdujo un hisopo estéril dentro
del tubo y se procedió a sembrar en las cajas Petri que contienen medio
Mueller Hinton. Se utilizaron cuatro antibióticos; Penicilina,
Cefoxitina, clindamicina y eritromicina. Se tuvo el cuidado de siempre
colocar los discos de Clindamicina y Eritromicina a no más de 20 mm de
distancia para poder observar la presencia o no de resistencia inducible
a la clindamicina. Las muestras se incubaron por 24 horas a 37°C
(2).
Discusión
El incremento en los últimos años en la producción avícola trae
consigo un mayor riesgo de contaminación cruzada con los pollos de
crianza. Actualmente, existe una gran preocupación, ya que en diversos
estudios se evidencia el uso inadecuado de antibióticos, lo que promueve
la resistencia a los mismos, reduciendo o anulando su efectividad
farmacológica. Las aves de granja pueden constituirse como un reservorio
de cepas y permitiendo que se vuelvan más patógenas y resistentes
(2).
Al ser los pollos de crianza destinados a faenamiento, la presencia
de bacterias en estos puede ser causantes de Enfermedades Transmitidas
por Alimentos (ETAs) lo cual llega a representar un problema de salud
pública, habiendo mayor índice de incidencia en los países en
desarrollo. La presencia de ETAs no afecta solo a la salud, sino que
también tiene un gran impacto a nivel económico, ya que de acuerdo a la
base de datos de producción a nivel mundial de alimentos el comestible
de mayor producción y consumo son los cárnicos, al haberse encontrado un
porcentaje bajo de cepas de S. aureus en las muestras,
es indicativo de que la carne no se encuentra contaminada, por lo tanto
no representa una pérdida económica para los dueños del galpón y la
producción no se vio afectada (20).
La capacidad que tiene el S. aureus de producir
enterotoxinas estafilocócicas hace que se vuelva uno de los mayores
microorganismos causantes de ETAs. La intoxicación por
Staphylococcus resulta de la ingestión de toxinas
producidas por estos y que se encuentran en los alimentos contaminados.
Si más bien no se hizo un apartado para este tema en la presente
investigación, es de importancia abordarlo y qué se haga énfasis en el
mismo en futuros estudios debido al elevado número de intoxicaciones
producto de la ingestión de dichas toxinas (21).
Tanto en países de Centroamérica como Sudamérica no existen estudios
que se hayan realizado en pollos de criadero vivos, todos fueron
realizados en pollos que ya fueron sacrificados tomando muestras de
pierna, pechuga, cornetes nasales, senos infraorbitales. Como menciona
Cotaquispe et al, es su estudio realizado en Perú,
donde aisló 97 cepas de S. aureus de las cuales
aproximadamente el 28 % (28/97) poseían resistencia a la meticilina.
Aunque no se encuentra similitud de este estudio con la investigación
realizada en aspectos como la toma de muestras, los resultados finales
son similares, encontrándose baja presencia de cepas de S.
aureus (2).
En centroamérica, en un estudio desarrollado en San Salvador, a
partir de muestras de pierna y pechuga de mercados municipales y cadenas
comerciales, de 302 muestras tomadas (147 piernas y 155 pechugas)
existió S. aureus en un 18% de las piernas y en un 9%
de las pechugas. Referente a porcentajes, la presencia de S.
aureus son valores similares en comparación a la investigación
realizada en pollos vivos (20%), la pequeña diferencia puede variar
debido a la manipulación en el proceso de faenado y deshuesado del pollo
antes de su expendio (20).
En base a una recopilación bibliográfica, en la cual se ha analizado
artículos referentes a SARM, se menciona que este se encuentra de manera
principal en animales de abasto como el cerdo, la vaca y los pollos,
siendo en los últimos la principal causa de problemas esqueléticos.
Luego de observar los pollos de los que se obtuvo la muestra en esta
investigación, se pudo observar diferentes deformidades en sus patas,
siendo evidencia de la posible presencia de
Staphylococcus. El empleo de antibióticos en el proceso
de la crianza de animales de granja suele ser rutinario, usándolos no
solo como profiláctico, sino para un mayor rendimiento de carne,
desencadenando en el aprovisionamiento de un caldo de cultivo óptimo
para la resistencia antimicrobiana (2,22).
Dentro de este estudio en pollos de crianza, se denota la presencia
de 12 cepas (20%) de S. aureus, las mismas que fueron
sometidas a diversas pruebas bioquímicas como la catalasa, coagulasa y
DNAsa que confirmaron las mismas. No se encontró resistencia a
meticilina ni penicilina. De igual manera, luego de realizarse el D-test
no se evidenció la presencia de cepas que posean resistencia inducible a
clindamicina. En este sentido, a pesar de haberse encontrado la
presencia de S. aureus en las aves, es importante
recalcar que dichas bacterias no han desarrollado una resistencia a los
antibióticos que se emplean en su tratamiento, permitiendo la
efectividad de estos y siendo un indicador de su uso adecuado.
Los resultados encontrados son bajos y satisfactorios en comparación
a otros estudios, como en una investigación realizada en Irak en donde
se encontró un porcentaje elevado de S. aureus en
pollos de engorde, llegando a encontrar la presencia de este en 196
muestras (84,8%) de las 231 tomadas. Esta gran diferencia puede deberse
principalmente al alto grado de manipulación y malas normas de higiene
por parte de los operadores ya que los mismos juegan un papel importante
en el transporte de las cepas (23).
Para mitigar los efectos y la propagación de estas bacterias aunque
sean mínimos, se puede desinfectar los criaderos en los cuales se
encuentran los pollos, aunque no se sabe con certeza si se procede a
realizar desinfecciones rutinarias en el galpón del que se tomó las
muestras, según investigaciones, se pueden emplear diversas opciones
para erradicar la presencia de S. aureus de los
criaderos como compuestos de amonio cuaternario (QAC), compuestos
fenólicos y desinfectantes de aceite de pino (24).
No se sabe con seguridad el motivo o medio por el cual estos
microorganismos llegaron a tomar presencia en el criadero de pollos. Sin
embargo, en una investigación que se realizó tomando muestras de
personal de un criadero de pollos de engorde, sugiere que está cepas
puede llegar gracias al transporte manual, es decir, a la manipulación
por parte del personal, contribuyendo de esta manera a la
propagación/diseminación de los mismos (25).
Al analizar la resistencia a la meticilina en el presente estudio fue
nula, lo que es algo positivo. En un estudio llevado en Mosul enfocado
en la identificación de SARM, reportó la detección del 66% (33/50) cepas
resistentes lo cual representa un riesgo para el consumidor, ya que los
SARM son considerados una amenaza potencial en vista de que pueden
llegar a provocar endocarditis en el consumidor. La diferencia en los
porcentajes o la presencia nula de SARM entre nuestro estudio y otras
investigaciones es atribuida a diversos puntos de contaminación que
puede exponerse el pollo desde su crianza hasta que llega al hogar del
consumidor, como el estado de los criaderos, manipulación por los
cuidadores, crianza, transporte o en los mataderos (26).
Por otra parte, en Países Bajos según Huijbers et.
al. No se reportó presencia de SARM en pollos de
engorde en granjas holandesas orgánicas lo cual evidencia resultados
equitativos a los de la investigación cursada. Esto se puede deber al
bajo contacto y manipulación de las aves (27).
En Trinidad se reportan que luego de haberse estudiado 287 pollos de
engorde se encontró prevalencia de SARM en tan solo el 0,7 % los cuales
poseían resistencia a varios agentes antimicrobianos, en cambio, en
nuestro estudio, todas las cepas presentaban sensibilidad por lo menos a
dos de los cuatro antibióticos empleados (28)
En el Ecuador, el ente regulatorio como es el Ministerio de
agricultura, ganadería, acuicultura y pesca establece una guía de buenas
prácticas avícolas. Presta especificaciones de infraestructura, higiene
y bioseguridad que deben cumplir los galpones en los que se crían los
pollos para asegurar el desarrollo saludable en condiciones óptimas para
los pollos de engorde, así como un compendio de normas para que los
manipuladores realicen sus tareas de la forma más higiénica posible
(29).
Esta investigación aporta con información que denota la importancia
en la crianza y manipulación aséptica de los pollos de criaderos, así
como el manejo correcto de los antibióticos en las aves que serán
destinadas a la venta al público ya que no se han encontrado estudios
similares que estén enfocados en las aves de crianza, sino, hacen
énfasis en el pollo ya sacrificado y expendio al consumidor.