![](3D"ArticuloV5_7_archivos/image019.jpg=)
Incidence of pu=
blic
transport routes in the environmental pollution, microbial of urban buses.<=
/span>
Ing. Raúl Fernando
Galarza Chacón Mg
Recibido:
07-12-2017 / Revisado: 04-02-2018 Aceptado: 21-03-2018/ Publicado: 01-04-20=
18
Abstract=
.
Urban
transport units in suitable environmental conditions are an ideal site for =
the
growth of bacteria. The research was based on the exploratory study with the
validation of the problem of microbiological environmental contamination by
qualitative and quantitative analysis of the inert surfaces of the buses th=
at
are in direct contact with the hands of the people. The methodology included
the use of validated methods for the collection and analysis of samples, su=
ch
as, swabbing of surfaces, culture of microorganisms in general and specific
media, Microgen ID A +B and petrifilm plates for
confirmation and quantification of a specific microorganism. The results sh=
owed
that 9 of 10 units have some type of bacterium. Also, there is a prevalence=
of
Staphylococcus aureus with 57.69%, then the quantitative analysis was
performed, which showed that the most contaminated place of the bus is the
vertical handle of the stop button, followed by the handle and the seat base
(391.76, 333.46, 228.18 colony forming units per square centimeter <=
/span>), respectively. The hypothesis showed that buses that circulate in
hospital areas have higher levels of microbial environmental contamination.=
Keywords
Las unidades de transporte urban=
o en
condiciones ambientales adecuadas son consideradas un sitio ideal para el
crecimiento de bacterias. La investigación parte del estudio exploratorio c=
on
la validación del problema de la contaminación ambiental microbiológica
mediante análisis cualitativo y cuantitativo de las superficies inertes de =
los
buses que están en contacto directo con las manos de los usuarios. La
metodología contempló la utilización de métodos validados para la toma y
análisis de las muestras, tales como: hisopado de superficies, cultivo de
microorganismos en medios generales y específicos, Mic=
rogen
y placas Petri film para confirmación y cuantificación de un microorganismo
específico. Los resultados arrojaron que 9 de cada 10 unidades poseen algún
tipo de bacteria, existiendo prevalencia del Staphylococcus aureus co=
n el
57,69%; el lugar más contaminado del bus es el asidero vertical de botón de
parada, seguido del asidero y base del asiento (391,76; 333,46; 228,18 unid=
ades
formadoras de colonia por centímetro cuadrado) respectivamente. La hipótesis
demostró que los buses que circulan por áreas de hospitales tienen niveles
mayores de contaminación ambiental microbiana.
Palabras Claves: Transporte Urbano, Contaminación Microbiológica,
Buses, Staphyl=
ococcus Aureus.
Introduc=
ción.
La investigación cobra importancia debido a que la
tercera causa de muerte a nivel del Ecuador es ocasionada por la influenza y
enfermedades respiratorias asociadas a diferentes patógenos, siendo la
población más susceptible a contraer estas enfermedades los niños y adultos
mayores. La motivación está alineada al Plan Nacional del Buen Vivir en su
objetivo número 3 relacionado a temas de Salud Pública.
En el mundo se presenta una gran inclinación al
transporte público urbano ya sea por economía, rapidez o también por
preferencia al momento de agilizar su traslado de un punto a otro; en diver=
sos
países desarrollados este tipo de transporte es muy útil ya que este medio =
de
transporte no descansa ni un solo instante y brinda un servicio excelente a=
la
ciudadanía, pero la parte importante se da al trabajar en las noches como e=
s el
caso en España, Estados Unidos, Brasil, entre otros (K=
assen,
2009).
Investigaciones recientes confirman que el transpo=
rte
urbano puede ser un reservorio para transmisiones de Staphylococcus, las transmi=
siones
cruzadas por S=
taphylococcus
pueden ser de varias fuentes, incluyendo hospitales, comunidades y ganado
(Roberts, 2013).
Durante las horas pico en particular, los autobuses
públicos pueden llegar a ser muy congestionados (Gayma=
rd
et al, 2016). La aglomeración puede proporcionar las condiciones de ca=
lor
y humedad internas que las bacterias y los gérmenes necesitan para su
desarrollo, que causa problemas de higiene para los pasajeros (Lutz et al,
2014). Casi la mitad (49,3%) de l=
os
usuarios de autobuses están preocupados por la presencia de bacterias en los
puntos de contacto dentro de un autobús, tales como barandillas, tejidos de=
los
asientos y los botones" (Yang et al, 2015). Las superficies de contacto en ent=
ornos
con un gran tránsito de masas suponen un reservorio óptimo
para los microbios infecciosos. Las condiciones de aglomeración en
lugares cerrados favorecen la contaminación (Conceicao
et al, 2013)
por bacterias entre miles de personas que se movilizan
diariamente en la ciudad de Ambato. El Estaphylococos aureus puede
sobrevivir por largos períodos en los objetos inanimados, lo que puede
representar un reservorio importante para su difusión (French & Otter,
2009). Las patologías respiratorias pueden atacar directamente a grupos
vulnerables como niños, adultos mayores y mujeres embarazadas sobre todo en
ambientes de alta densidad de usuarios como medios de transporte urbano,
hospitales, mercados, etc.
Material=
es y
métodos.
Recolecc=
ión
de muestras ambientales: Debido a la inexistencia=
de
una normativa nacional o internacional que explique la metodología que indi=
que
los lugares y número de tomas de muestras en el interior del bus, número, h=
ora
y día de toma de muestras, se planteó un protocolo que permite replicar
investigaciones similares:
Número de muestras tomadas en el interior del bus:=
Se real=
izó
un muestreo no aleatorias por duplicado en el asidero vertical de aviso de
parada, asidero y base del asiento, se seleccionaron debido a que son los
lugares con los más altos niveles de contacto manual con las superficies
inanimadas en el interior del bus (Coia, 2006).=
Delimitación temporal: La
investigación se realizó entre los meses de octubre 2016 – octubre 2017.
Horario de toma de muestras: El monitoreo se efectuó en la noche, siendo variante entre 6 a 10 de =
la
noche dependiendo de la cooperativa y en función del último recorrido de ca=
da
una de las unidades de transporte antes de cualquier limpieza (acumulación =
de
bacterias durante el día), la metodología que se utilizó contempló las
condiciones más adversas del ambiente tanto para el día como para la hora <=
/span>(Lutz et=
al,
2014).
Día de toma de muestras: El muestreo se realizó el día lunes, por ser el día de mayor afluenci=
a de
personas a la ciudad de Ambato, este criterio de muestreo se seleccionó tom=
ando
en cuenta condiciones extremas de contacto de usuarios con los lugares
contaminados, además de la interacción entre personas de las zonas urbanas y
rurales en el interior de los buses.
Registro=
de
condiciones ambientales en el interior y exterior del bus: La temperatura y humedad relativa ambiental, y las condiciones
ambientales en el interior del bus, la toma de muestra en las superficies se
realizó con la utilización del medidor de condiciones ambientales Kestrel 3500.
Selecció=
n de
rutas: Se eligieron las rutas de los autobuses que
servían a los principales hospitales y las que no, se seleccionan en funció=
n de
la mayor demanda en número de pasajeros. Formalmente, el cantón tiene un
registro de dos hospitales generales: el Hospital General Ambato y el Hospi=
tal
IESS, ubicados en la cabecera cantonal; mientras que se ha considerado como
hospital básico al Municipal Nuestra Señora de la Merced.
Método p=
ara
la toma de muestras: La toma de muestras se realizó mediante el método=
de
hisopado de superficies por ser la metodología recomendada para lugares que
tienen superficies que no son planas, posteriormente se siembra cada una de
ellas en agar (French & Otter, 2009).
Aislamiento e identificación: Se realizó en medios de Agar sangre y MacConkey, se utilizó pruebas
bioquímicas, además el método de Microgen para
identificar bacterias que no son comunes.
Utilización de métodos válidos para análisis de
laboratorio: La realización de los
análisis se efectuó con la aplicación de medidas de control ambiental
determinados por los estándares de laboratorio de microbiología.
Fase cualitativa y cuantitativa: En la fase cualitativa se identificó y caracterizó las bacterias en e=
l interior
de los buses, luego se cuantificó los niveles de concentración de cada una =
en
los sitios determinados del muestreo.
Población de estudio: La población de estudio considerada para la investigación está formada
por las operadoras de transportes que permiten la movilidad de todas las
personas, dentro de la ciudad de Ambato transitan 403 unidades diariamente,=
las
operadoras que se encuentran autorizadas para circular son las siguientes: =
Jerpazsol, Unión Ambateña, Tungurahua, Libertadores y=
Vía
Flores las cuales son consideradas como trasporte urbano cubren diferentes
rutas para satisfacer las necesidades de los habitantes debido a la demanda=
que
se genera día tras día, lo que se presenta en la Tabla 1.
Tabla=
1. Población de las Unidades de transporte ur=
bano
de Ambato
|
Población de estudio |
# de Vehículos por operadora |
|
Operadora Tungurahua |
144 |
|
Operadora Vía Flores |
45 |
|
Operadora Unión Ambateña |
98 |
|
Operadora Jerpazsol |
51 |
|
Operadora Los Libertadores |
65 |
|
TOTAL |
403 |
Fuente: Dirección de Tránsito, Transporte y Movilidad.
Muestreo=
: Se determinó el tamaño de la muestra aplicando la fórmula para cálcul=
o de
la muestra para poblaciones finitas, se estableció un nivel de confianza del
95% y error del 5%, el tamaño de la muestra fue de 78 buses urbanos. Para la
determinación del número de vehículos que serán muestreados se utilizó un
muestreo probabilístico estratificado proporcional indicado en la Tabla 2, =
el
que permitió obtener el número exacto de unidades por operadora.
Tabla 2: Número de vehículos que se deben muestrear por operadora.
|
Cooperativa |
% |
# |
|
Tungurahua |
35,73 |
28 |
|
Vía Flores |
11,17 |
9 |
|
Unión Ambateña |
24,32 |
19 |
|
Jerpaz=
sol |
12,66 |
10 |
|
Los Libertadores |
16,13 |
12 |
|
|
Total |
78 |
Fuente: Grupo de investigación.
Se aplicó un muestreo probabilístico estratificado proporcional para =
la
determinación del número de unidades por cooperativa. %: Porcentaje que
representa cada cooperativa del total; #: Número de buses para el muest=
reo.
Zonas de toma de muestras: En la
Figura1, se ilustran los lugares definidos para la toma de muestras en un b=
us.
Figura 1: Selección de puntos par=
a la
toma de muestras en el interior del bus.
|
|
![](3D"ArticuloV5_7_archivos/image021.jpg")
<=
![endif]>Fuente: Grupo de investigación.<= o:p>
Conserva=
ción
y transporte de la muestra: Se
colocaron en un contenedor isotérmico, de tal manera de asegurar que la
temperatura del contenedor no sea mayor de 14°C, a fin de asegurar la vida =
útil
de la muestra hasta su llegada al laboratorio. El tiempo de transporte entr=
e la
toma de muestra y la recepción en el laboratorio estará en función estricta=
de
dicha temperatura, no debiendo exceder las 24 horas y excepcionalmente las =
36
horas.
Diseño
experimental y estadístico de la investigación: se basó en el análisis estadístico para comparación de 2 muestras
independientes, como se muestra en la Tabla 3, se estudió si existe relación
entre el valor medio de una variable respuesta o característica (nivel de
contaminación microbiana) y una variable cualitativa (Bus circula o no por =
un
hospital).
Tabla 3: Diseño experimental para compara=
ción
de 2 muestras independiente.
|
|
Variab=
le dicotómicaa |
|
|
= Variable cuantitativa<= o:p> |
Circula por un hospital |
No circula por un hospital |
|
=
M1 |
- |
- |
|
=
M2 |
- |
- |
|
=
Mn-1 |
- |
- |
|
=
Mn |
- |
- |
Fuente:<=
/span> Grupo de
Investigación.
M1 hasta Mn son valores de las repeticiones de las
mediciones determinadas de acuerdo al muestreo. a=
Se
determina de acuerdo a las rutas que cada una de las cooperativas da el
servicio.
Valores
máximos permisibles para bacterias patógenas: "Las
superficies inertes que tengan calidad sanitaria aceptable deben tener valo=
res
menores a 400 unidades formadoras de colonia por centímetro cuadrado
(NOM-093-SSA1, 1994).
Hipótesis
general de la investigación: Se plantea el siguiente enunciado
como hipótesis de la investigación:
"En las rutas de transporte urbano que circulan por áreas de
hospitales existe contaminación ambiental en los asideros de los buses de la
ciudad de Ambato".
Resultad=
os y
discusión.
Debido a=
la
complejidad de la investigación se trató de controlar y cuantificar todos l=
os
factores externos (variables exógenas) que influyen en la variable de respu=
esta
(contaminación ambiental microbiológica en la superficie), tales como la ru=
ta
(lugares por donde circulan las unidades), hora y día de toma de muestras,
lugar de la toma de muestras pueden tener incidencia en la incertidumbre de=
los
resultados obtenidos.
Resultados investigación cualitativa: <=
span
style=3D'font-size:12.0pt;line-height:115%;font-family:"Times New Roman",se=
rif;
mso-fareast-font-family:"Times New Roman";mso-fareast-language:ES'>Para
verificar y validar el problema de contaminación ambiental de las superfici=
es
de los transportes urbanos se realizó un screening inicial, para esto se
planificó la toma de muestras de los asideros verticales del botón de aviso=
de
parada, debido a que este lugar es el de mayor contacto de las personas con
superficies inanimadas del bus, cuyos resultados se evidencian en la Tabla =
4.
Tabla 4:=
Frecuenc=
ia
de bacterias identificadas en el interior del bus.
|
=
Bacteria |
Frecue=
ncia
|
Porcen=
taje |
|
=
Staphy=
lococcus aureus |
45 |
57,69 |
|
=
Staphy=
lococcus epidermi=
dis |
15 |
19,23 |
|
=
No hay crecimiento |
8 |
10,25 |
|
=
Klebsi=
ella pneumoni=
ae |
5 |
6,41 |
|
=
Escher=
ichia coli |
5 |
6,41 |
|
=
Total |
78 |
100,00=
|
Fuente: Grupo de investigación.
Resultad=
os
investigación cuantitativa:
En la Fi=
gura
3, se presenta la planificación para el monitoreo ambiental cuantitativa en=
el
interior de los buses.
Figura 3: Valores promedios por cada luga=
r de
toma de muestra.
![](3D"ArticuloV5_7_archivos/image022.png")
Fuente:<=
/span> Grupo de
investigación.
Donde:
A: Ficoa=
-
Terremoto – Totoras.
B: La
Florida - 4 Esquinas – Cashapamba.
C: La Jo=
ya -
Cdla Militar.
D: Los
Ángeles.
E. Juan
Benigno Vela - Redondel Izamba.
Análisis
inferencial entre el lugar de la toma de muestra en el interior del bus y la
carga microbiana en la superficie: Sirvió para comparar varios grup=
os
en una variable cuantitativa. Se trata, por tanto, de una generalización de=
la
Prueba de T para dos muestras independientes al caso de diseños con más de =
dos
muestras, como se evidencia en la tabla 5.
Tabla 5: Prueba A=
NOVA
de un factor lugar de toma de muestra vs. Carga microbiana.
|
=
F.V. |
F |
p valo=
r |
|
=
Modelo |
91,06 |
<0,0001 |
|
=
Lugar de la toma de la muestra |
91,06 |
<0,0001 |
Fuente: Grupo de investigación.
Se aplic=
ó un
nivel de significancia =3D 0,05. F.V.: Fuentes de variación, F: Estadístico=
F, p
valor: Probabilidad de que Ho sea verdadera.
En el
análisis de ANOVA de un factor el nivel de significancia de 0,0001es menor a
0.05, esto quiere decir que se acepta la hipótesis alterna H1 “=
Existe
influencia del lugar de la toma de muestra en el interior del bus sobre la
contaminación microbiana” y se rechaza la hipótesis nula Ho.
Los siti=
os
donde se lleva la toma de muestras tienen diferencias en cuanto al valor de=
la carga
microbiana por lo tanto la contaminación en el interior del bus no es igual=
, el
asidero vertical de aviso de parada presenta la mayor contaminación lo que =
se
evidencia en la Figura 4.
Figura 4: Sitios de toma de muestras en el
bus (base y asidero del asiento y asidero vertical).
![](3D"ArticuloV5_7_archivos/image023.jpg")
Fuente: Grupo de investigación.
Análisis
inferencial entre el tipo de material del asidero vertical y la carga
microbiana en la superficie: Se aplica la prueba ANOVA para
determinar el estadístico de prueba para su comparación que se muestra en la
tabla 6.
Tabla 6: Prueba A=
NOVA
de un factor Lugar Material del asidero vertical vs. Carga microbiana.
|
=
F.V. |
F |
p valor |
|
=
Modelo |
0,68 |
0,5154 |
|
=
Lugar de toma de la muestra |
0,68 |
0,5154 |
Fuente: Grupo de Investigación.
Se aplica un nivel de significancia =3D 0,05.
En el
análisis de ANOVA se tiene un factor de nivel de significancia de 0,5154 qu=
e es
mayor a 0,05, por lo que se acepta la hipótesis alterna Ho “No existe influencia del tipo de material del asidero vertical sob=
re
la contaminación microbiana en la superficie.” La prueba de Tukey deter=
mina
que no existe diferencia entre las medias de ninguno de los grupos, por lo
tanto, la contaminación en todos los materiales estadísticamente es la mism=
a.
Análisis inferencial entre la ruta y la carga
microbiana en la superficie: Para el ritual de la significanc=
ia
estadística para la hipótesis principal, se desarrolló un diseño experiment=
al
teniendo como criterio seleccionar dos rutas de las cinco para la comparaci=
ón,
que se evidencia en la tabla 7.
Tabla 7:=
Diseño
experimental de la investigación.
|
=
Clasificación |
Grupo 1 |
Grupo 2 |
p valor* |
|
=
Ruta |
Ruta hospital |
Ruta no hospital |
<0,0001 |
Fuente: Grupo de investigación.
Se presentan los estadísticos
descriptivos para cada uno de los niveles de la variable independiente, así
como para el total de la muestra. Se comprobó que existe diferencia
significativa estadística entre el promedio de los grupos.
En el
análisis de T student para muestras independien=
tes el
nivel de significancia es 0,0001 es menor a 0.05, esto quiere decir que se
acepta la hipótesis alterna H1 “En=
las
rutas de transporte urbano que circulan por áreas de hospitales existe mayor
contaminación ambiental en el asidero vertical de los buses de la ciudad de
Ambato” y se rechaza la hipótesis nula Ho.
Conclusiones.
- La hipótesis general de la investigación
demuestra que las rutas de transporte urbano que circulan por áreas de hospital=
es
tienen niveles mayores de con=
taminación
ambiental en el asidero verti=
cal,
base y asidero del asiento de=
los
buses, en relación a las rutas que no circulan por hospitales; en
condiciones adecuadas tanto del ambiente como de las personas,
enfermedades como gripe, resfrío, influenza, pasando por alergias,
dermatitis, conjuntivitis y tuberculosis se pueden contraer en el inte=
rior
de los buses.
- Se identifica que en el 80% (62/78) de cultiv=
os
hubo crecimiento de bacterias Cocos Gram Positivos, el 10% (8/78) exis=
tió
bacterias Bacilos Gram negativos mientras que el 10% (8/78) no existió
ningún tipo de crecimiento, si bien ambos tipos pueden causar enfermed=
ades
infecciosas estas se vuelven una preocupación para la salud pública cu=
ando
su estructura celular las hace resistentes a los antibióticos.
- Luego de analizar los datos primarios del
problema se establece la prevalencia que tiene la bacteria Staphylococcus<=
/i> aureus
en relación a las otras encontradas, el resultado revelo que en
aproximadamente el 60% de las unidades de transporte analizadas está
presente esta bacteria, siendo potencialmente patógena en personas que=
se
encuentran con sistemas inmunocomprometidos y que de no ser tratada a
tiempo puede causar graves secuelas en la salud.
- Aplicado el análisis
inferencial de la influencia del tipo de material del asidero vertical
sobre los niveles de contaminación microbiológica, se determina que
estadísticamente no existe incidencia de estas variables, es decir el
aluminio, acero inoxidable y con recubrimiento polimérico tienen simil=
ares
valores (449,23; 456,25 y 473,17 unidades formadoras de colonia por
centímetro cuadrado
Referencias bibliográfica=
s.
Alexander, J. W. (2009). History =
of
the medical use of silver. Surgical Infe=
ctions,
10(3), 289-292. doi:10.1089/sur.2008.9941
Conceicao, T.,
Diamantino, F., Coelho, C., de Lencastre, H., &=
amp;
Aires-de-Sousa, M. (2013). Contamin=
ation
of public buses with MRSA in Lisbon, Portugal: a possible transmission rout=
e of
major MRSA clones within the community. PLoS On=
e,
8(11), e77812. doi: 10.1371/journal.pone.007781=
2
Coia, J. E., Duckworth, G. J., Edwards, D. I., Farrington, M., Fry, C.,
Humphreys, H.,. Infection Control Nurses, A. (20=
06).
Guidelines for the control and prevention of meticilli=
n-resistant
Staphylococcus aureus (MRSA) in healthcare facilities. J Hosp Infect, 63 Su=
ppl
1, S1-44. doi: 10.1016/j.jhin.2006.01.001
Gaymard<=
/span>, A.,
Kassem, II. (2009). Concer=
ning
public transport as a reservoir of methicillin-resistant staphylococci. Lett
Appl Microbiol, 48(2), 268. doi: 10.1111/j.1472=
-765X.2008.02518.x
Lutz, J. K., van Balen, J., Crawford, J. M., Wilkins, J. R., Lee, J., =
Nava-Hoet, R. C., & Hoet, =
A. E.
(2014). Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in public transportation
vehicles (buses): Another piece to the epidemiologic puzzle. American Journ=
al
of Infection Control, 42(12), 1285-1290. doi:
10.1016/j.ajic.2014.08.016
Otter, J. A., & French=
, G.
L. (2009). Bacterial contamination on touch surfaces in the public transport
system and in public areas of a hospital in London. Lett Appl Microbiol, 49=
(6),
803-805. doi: 10.1111/j.1472-765X.2009. 02728.x=
Peng, Y., Ou,
Q., Lin, D., Xu, P., Li, Y., Ye, X., Yao, Z. (2015). Metro system in Guangz=
hou
as a hazardous reservoir of methicillin-resistant Staphylococci: findings f=
rom
a point-prevalence molecular epidemiologic study. Scientific Reports, 5(1).
doi:10.1038/srep16087
Roberts, M. C., Soge, O. O., & No, D. (2013). Comparison of Multi=
-Drug
Resistant Environmental Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Isolated
from Recreational Beaches and High Touch Surfaces in Built Environments. Front
![3Deditorial1.png](3D"ArticuloV5_7_archivos/image024.jpg")
Para cit=
ar
el artículo indexado.
Galarza R., Espín S., Zaldumbide F., Tene O & López I. (2018). Incidencia de las rutas del transporte
público en la contaminación ambiental microbiana de buses urbanos Revista electrónica Ciencia Digital 2(2),
110-122. Recuperado desde: http://cienciadigital.org/revistacienciadigital2=
/index.php/CienciaDigital/article/view/76/71
![3Deditorial1.png](3D"ArticuloV5_7_archivos/image025.jpg")
El artículo que se publica es de exclusiva responsabilidad de los autor=
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El articulo queda en propi=
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![3D"logo_catalogo3b.jpg"](3D"ArticuloV5_7_archivos/image027.jpg")